抗凝血酶Ⅲ蛋白是一種人體血漿蛋白,臨床上作為藥物主要用于血液性疾病的治療。如圖為培育轉(zhuǎn)基因綿羊生產(chǎn)抗凝血酶Ⅲ蛋白藥物的流程圖。請回答:
(1)在過程①構(gòu)建的基因表達載體中,為實現(xiàn)抗凝血酶Ⅲ基因能在轉(zhuǎn)基因綿羊的乳腺細胞中表達,應讓該基因與 乳腺蛋白基因乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件結(jié)合在一起,轉(zhuǎn)基因綿羊進入泌乳期后,可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)抗凝血酶Ⅲ蛋白。過程④中采用的最為有效的技術(shù)是 顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。
(2)過程⑤涉及到的動物細胞工程技術(shù)是 動物細胞核移植技術(shù)動物細胞核移植技術(shù)。選用Ⅱ中期的卵母細胞作為受體細胞,對受體細胞作去核處理的目的是 保證重組細胞中的核遺傳物質(zhì)全部來自整合有目的基因的成纖維細胞保證重組細胞中的核遺傳物質(zhì)全部來自整合有目的基因的成纖維細胞。
(3)過程⑥早期胚胎培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)液成分除了糖類、氨基酸、無機鹽、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)外,通常還需要加入 動物血清動物血清等一些天然成分。過程⑦移植后的胚胎在受體子宮存活的生理學基礎是 受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應。
【答案】乳腺蛋白基因;顯微注射技術(shù);動物細胞核移植技術(shù);保證重組細胞中的核遺傳物質(zhì)全部來自整合有目的基因的成纖維細胞;動物血清;受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/6 8:0:9組卷:9引用:1難度:0.7
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1.學習以下材料,回答(1)~(4)題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子(UAA、UAG或UGA),從而使肽鏈合成提前終止,造成蛋白質(zhì)的功能改變,引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%~15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?;虻腸DNA序列或是有治療價值的基因(如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具)通過一定的方式導入人體靶細胞內(nèi),達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達,都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達,但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA(sup-tRNA)由天然tRNA改造而來,它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子,使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯,獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因,是相關(guān)基因發(fā)生無義突變,產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體(圖1),以及針對該無義突變設計的sup-tRNA表達載體(產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr),將其導入細胞進行研究,發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較,sup--tRNA的作用更加顯著(圖2);進一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中,實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存,實現(xiàn)對該病癥的有效治療,其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看,G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機,而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一,且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài),所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性,因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應用前景。
(1)侵染時,作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細胞膜上的
(2)除了引入的氨基酸較為單一,不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài),我們還可推斷,用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處
(3)研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體,目的是通過檢測
(4)有文獻報道,已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設計獨特的治療策略,這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:26引用:1難度:0.6 -
2.人類基因組計劃測定了人體的24條染色體,這24條染色體是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/31 0:30:1組卷:112引用:7難度:0.7 -
3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi),可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
(1)圖示以mRNA為材料通過
(2)與選用老葉相比,選用嫩葉更容易提取到mRNA,原因是
(3)將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.7
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