浙江大學(xué)農(nóng)學(xué)院喻景權(quán)教授課題組研究發(fā)現(xiàn)，一種植物激素--油菜素內(nèi)酯能促進(jìn)農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。用油菜素內(nèi)酯處理后，許多參與農(nóng)藥降解的基因（如P450基因和紅霉素抗性基因）的表達(dá)和酶活性都得到提高，在這些基因“指導(dǎo)”下合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì)，有的則被直接排出體外。某課題進(jìn)行了如圖的操作，請回答下列問題：
（1）獲得油菜素內(nèi)酯合成酶基因的方法 從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增（至少答出兩種）。步驟①用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因的前提是 要有一段已知目的基因的核苷酸序列要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成 引物引物；步驟②用到的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
（2）圖中導(dǎo)入重組質(zhì)粒的方法是 感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法，在導(dǎo)入之前應(yīng)用一定濃度的 氯化鈣溶液氯化鈣溶液處理受體細(xì)菌。
（3）導(dǎo)入重組質(zhì)粒2以后，往往還需要進(jìn)行檢測和篩選，在含有 目的基因的DNA片段上目的基因的DNA片段上用放射性同位素標(biāo)記制成探針，檢測是否導(dǎo)入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入 紅霉素紅霉素可將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫中獲取、人工合成的目的基因、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增；要有一段已知目的基因的核苷酸序列；引物；限制酶和DNA連接酶；感受態(tài)細(xì)胞轉(zhuǎn)化法；氯化鈣溶液；目的基因的DNA片段上；紅霉素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：2引用：3難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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