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基因工程乙肝疫苗是乙肝表面抗原(HBsAg)亞單位疫苗,制作過程是采用現(xiàn)代生物技術(shù)將乙肝病毒表達表面抗原的基因進行質(zhì)粒構(gòu)建,將其導(dǎo)入CHO細胞(中國倉鼠卵巢細胞)中,通過培養(yǎng)這種CHO細胞來表達乙肝表面抗原亞單位,從而獲得疫苗,基本流程如圖1所示。請回答下列問題。

(1)要獲取HBsAg基因,除圖中方法外,還可以根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)推測
氨基酸序列
氨基酸序列
,進而推測目的基因的脫氧核苷酸序列,再進行人工合成。
(2)圖中①過程選用的限制酶是
HindⅢ和XhoⅠ
HindⅢ和XhoⅠ
,理由是
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點,但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因
HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點,但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因
。
(3)利用PCR技術(shù)擴增HBsAg基因片段的前提條件是
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
要有一段已知目的基因的核苷酸序列
,以便合成引物。圖2是某同學(xué)設(shè)計的一組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列):

該組引物是否合理
,理由是
引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對,這影響了與模板的堿基互補配對
引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對,這影響了與模板的堿基互補配對
。
(4)若一個HBsAg基因通過PCR擴增了4次,在子代基因中同時含有兩個引物的基因占
7
8
7
8
。
(5)HBsAg基因在CHO細胞中表達需要有特異性的
啟動子
啟動子
,控制基因表達的起始時間和表達程度。HBsAg基因能否在CHO細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是
CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因

【答案】氨基酸序列;HindⅢ和XhoⅠ;HBsAg基因含有限制酶HindⅢ、SamⅠ和XhoⅠ的切割位點,但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上,若選用限制酶SmaⅠ則會破壞目的基因;要有一段已知目的基因的核苷酸序列;否;引物Ⅱ自身折疊后會出現(xiàn)局部堿基互補配對,這影響了與模板的堿基互補配對;
7
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;啟動子;CHO細胞的DNA上是否插入了HBsAg基因
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:22引用:1難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
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  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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