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幽門螺桿菌(Hp)屬于一類致癌物,Hp與胃炎、消化性潰瘍和胃癌等多種疾病有關(guān)。Hp的Ipp20基因能合成其特有的Ipp20蛋白質(zhì),科研人員據(jù)此利用基因工程制備Hp疫苗,該過程所選擇的質(zhì)粒及操作步驟如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:

(1)通過PCR擴增Ipp20基因的反應(yīng)需要在
緩沖
緩沖
溶液中進行,擴增Ipp20基因時的基本條件包括DNA模板、原料、Taq DNA聚合酶、
引物
引物
等。
(2)在PCR反應(yīng)體系中一般需要加入Mg2+,原因是
TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活
TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活
??蒲腥藛T探究了不同濃度的Mg2+對PCR擴增效果的影響,結(jié)果如表所示??蒲腥藛T認為PCR反應(yīng)高效進行,Mg2+濃度并不是越高越好,據(jù)表分析,依據(jù)是
表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低
表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低
。
Mg2+濃度/(mmol?L-1 0 2 3 4 5 6
Ipp20基因相對含量 - + ++ +++++ ++++ +++
注:“-”表示未檢測到Ipp20基因,“+”表示檢測到Ipp20基因,且“+”越多,檢測到的含量越多。
(3)已知在構(gòu)建基因表達載體時使用了限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割質(zhì)粒和Ipp20基因。科研人員采用了影印法篩選含有Ipp20基因的大腸桿菌,即使用無菌的線氈布壓在培養(yǎng)基A(添加潮霉素)的菌落上,帶出少許菌種,平移并壓在培養(yǎng)基B(添加氯霉素)上。根據(jù)圖示結(jié)果分析,含有Ipp20基因的大腸桿菌應(yīng)從培養(yǎng)基
A
A
中獲取,理由是
限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長
限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長

【答案】緩沖;引物;TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活;表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低;A;限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/8/8 8:0:9組卷:7引用:4難度:0.5
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括
     
     
    。
    (2)生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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