幽門螺桿菌(Hp)屬于一類致癌物,Hp與胃炎、消化性潰瘍和胃癌等多種疾病有關(guān)。Hp的Ipp20基因能合成其特有的Ipp20蛋白質(zhì),科研人員據(jù)此利用基因工程制備Hp疫苗,該過程所選擇的質(zhì)粒及操作步驟如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:
(1)通過PCR擴增Ipp20基因的反應(yīng)需要在 緩沖緩沖溶液中進行,擴增Ipp20基因時的基本條件包括DNA模板、原料、Taq DNA聚合酶、引物引物等。
(2)在PCR反應(yīng)體系中一般需要加入Mg2+,原因是 TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活??蒲腥藛T探究了不同濃度的Mg2+對PCR擴增效果的影響,結(jié)果如表所示??蒲腥藛T認為PCR反應(yīng)高效進行,Mg2+濃度并不是越高越好,據(jù)表分析,依據(jù)是 表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低。
Mg2+濃度/(mmol?L-1) | 0 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Ipp20基因相對含量 | - | + | ++ | +++++ | ++++ | +++ |
(3)已知在構(gòu)建基因表達載體時使用了限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割質(zhì)粒和Ipp20基因。科研人員采用了影印法篩選含有Ipp20基因的大腸桿菌,即使用無菌的線氈布壓在培養(yǎng)基A(添加潮霉素)的菌落上,帶出少許菌種,平移并壓在培養(yǎng)基B(添加氯霉素)上。根據(jù)圖示結(jié)果分析,含有Ipp20基因的大腸桿菌應(yīng)從培養(yǎng)基
A
A
中獲取,理由是 限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長
限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】緩沖;引物;TaqDNA聚合酶需要Mg2+激活;表中Mg2+濃度為4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量最高,Mg2+濃度高于4mmol?L-1時,Ipp20基因相對含量降低;A;限制酶XhoⅠ和XbaⅠ切割后,重組質(zhì)粒中不含有氯霉素抗性基因,因此含Ipp20基因的大腸桿菌不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基B中生長
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/8 8:0:9組卷:7引用:4難度:0.5
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