噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白基因插入到噬菌體的適當(dāng)置，使外源蛋白最終展示引子代噬菌體表面的技術(shù)。為臨床檢測(cè)腫瘤壞死因子（TNFα，由巨噬細(xì)胞分泌的一種蛋白質(zhì)），利用“噬菌體展示技術(shù)”獲得TNFα抗體的部分過程如圖所示，其中a、b、c均為噬菌體。請(qǐng)分析并回答下列相關(guān)問題：（1）獲取TNFα抗體的基因時(shí)，可從康復(fù)者的漿細(xì)胞中提取總RNA，加入 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶獲得cDNA，利用抗體的VH和VL設(shè)計(jì)引物，以雙鏈cDNA為模板，PCR得到抗體可變區(qū)基因序列。擴(kuò)增該段時(shí)，還需加入 TaqTaq酶，若要將具復(fù)制15次，則共需要引物 216-2216-2個(gè)。
（2）噬菌體結(jié)構(gòu)包括DNA和衣殼蛋白。獲得的TNFα抗體基因需插入到噬菌體的 衣殼蛋白基因衣殼蛋白基因之后，使表達(dá)的抗體以融合蛋白的形式展示在噬菌體表面。
（3）篩選過程中，噬菌體與目標(biāo)分子經(jīng)一定時(shí)間孵育，圖中噬菌體 cc（填字母）即為成功轉(zhuǎn)入TNFα抗體基因的噬菌體。將其洗脫后侵染大腸桿菌增殖，可得到大量TNFα抗體。在其感染大腸桿菌時(shí)，不需要不需要（“需要”或“不需要”）制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，原因是 因?yàn)樵撌删w可以侵染到大腸桿菌因?yàn)樵撌删w可以侵染到大腸桿菌。
（4）上述過程獲得的TNFα抗體與康復(fù)者體內(nèi)的不完全相同，原因是大腸桿菌 是原核生物，不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)分泌蛋白進(jìn)行加工是原核生物，不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)分泌蛋白進(jìn)行加工。
（5）關(guān)于噬菌體展示技術(shù)的敘述，正確的是 ABCABC。
A．噬菌體簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)組成將內(nèi)部基因與表達(dá)在外部的蛋白質(zhì)建立聯(lián)系
B．篩選的高效性和特異性，使挑選到高親和力的抗體成為可能
C．所挑選到的微量存在的噬菌體可通過感染大腸桿菌得到富集擴(kuò)大
D．與單克隆抗體技術(shù)相比，其產(chǎn)量較低，無法大量制備
【考點(diǎn)】噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；Taq；216-2；衣殼蛋白基因；c；不需要；因?yàn)樵撌删w可以侵染到大腸桿菌；是原核生物，不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)分泌蛋白進(jìn)行加工；ABC
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.7
相似題
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1．噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)噬菌體蛋白質(zhì)合成的正確敘述是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：4引用：1難度：0.9 -
2．如圖是著名的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)和肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的部分步驟：
（1）赫爾希和蔡斯采用的實(shí)驗(yàn)方法是，該實(shí)驗(yàn)?zāi)芊裼?SUP>15N來標(biāo)記，為什么？．
（2）若要大量制備32P標(biāo)記的噬菌體，需先用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)，再用噬菌體去感染它．T2噬菌體DNA復(fù)制的場(chǎng)所是．
（3）從圖中所示結(jié)果分析，該實(shí)驗(yàn)標(biāo)記的是（DNA還是蛋白質(zhì)），當(dāng)接種噬菌體后培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)發(fā)現(xiàn)上清液中的放射性升高，最可能的原因是復(fù)制增殖后的噬菌體．
（4）如圖的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”得出的結(jié)論是．加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是．發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：13引用：1難度：0.5 -
3．圖1為某同學(xué)重復(fù)了探究生物遺傳物質(zhì)的“T2噬菌體侵染大腸桿菌實(shí)驗(yàn)”（甲、乙）和圖2“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”．
據(jù)圖回答下列問題：
（1）圖甲中T2噬菌體DNA復(fù)制的場(chǎng)所是．
（2）圖乙中若用含32P的噬菌體侵染大腸桿菌，經(jīng)過離心，上清液也有很低的放射性，原因可能是．若改用14C、3H、15N等標(biāo)記噬菌體而細(xì)菌未標(biāo)記，在子代噬菌體中，中能找到標(biāo)記元素．
（3）研究發(fā)現(xiàn)T2噬菌體屬于噬菌體中的一類，除此之外還有λ噬菌體等，λ噬菌體的性質(zhì)較“溫和”感染細(xì)菌后并不使細(xì)菌死亡而是將自身的DNA插入進(jìn)細(xì)菌的DNA，隨細(xì)菌DNA一起復(fù)制，所以常用于基因工程中做為（工具）．假定原宿主細(xì)胞中某一DNA片段含有3000個(gè)堿基對(duì)，其中G+C占?jí)A基總數(shù)的30%，插入后的DNA整段轉(zhuǎn)錄形成的mRNA含有4000個(gè)堿基，其中A和U占60%，則插入進(jìn)來的噬菌體DNA片段中A+T占該插入片段堿基總數(shù)的比例為．
（4）圖2的“肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)”得出的結(jié)論是．加熱殺死的S型菌中的DNA仍有活性的原因可能是．發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：91引用：1難度：0.3
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