利用微生物分解廢紙是一種環(huán)保的方式，但廢紙中的纖維素分子量大，不能直接進(jìn)入酵母菌，且酵母菌無法分解利用環(huán)境中的纖維素。為解決這一難題，科學(xué)家將纖維素酶基因通過重組質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌。其所用質(zhì)粒及其酶切位點(diǎn)如圖 1，外源 DNA 上纖維素酶基因及其酶切位點(diǎn)如圖 2。
（1）為使纖維素酶基因能夠與質(zhì)粒有效組合，應(yīng)選用最合適的限制酶是 BB。選該項(xiàng)而不選擇其他選項(xiàng)的原因是 纖維素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，因此不能選擇BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒，可能出現(xiàn)目的基因或質(zhì)粒的自身連接，因此為使纖維素酶基因能夠與質(zhì)粒有效組合，應(yīng)選用最合適的限制酶是HindⅢ和PstⅠ纖維素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，因此不能選擇BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒，可能出現(xiàn)目的基因或質(zhì)粒的自身連接，因此為使纖維素酶基因能夠與質(zhì)粒有效組合，應(yīng)選用最合適的限制酶是HindⅢ和PstⅠ。
A.BamHⅠ和 PstⅠB.HindⅢ和 PstⅠC.PstⅠD.BamHⅠ和 HindⅢ
（2）科學(xué)家進(jìn)一步構(gòu)建了含 3 種不同基因片段的重組質(zhì)粒，進(jìn)行了一系列的研究。如圖 3 是酵母菌轉(zhuǎn)化及纖維素酶在工程菌內(nèi)合成與運(yùn)輸?shù)氖疽鈭D。圖 3 中已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的菌株有 菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。
（3）設(shè)置菌株Ⅰ作為對(duì)照，是為了驗(yàn)證 質(zhì)粒和酵母菌質(zhì)粒和酵母菌不攜帶纖維素酶基因。
（4）將 4 株菌株分別置于以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基上，其中菌株Ⅰ、Ⅱ不能存活，請解釋菌株Ⅱ不能存活的原因 菌株Ⅱ中缺少信號(hào)肽編碼序列，導(dǎo)致所產(chǎn)生的纖維素酶無法分泌到細(xì)胞外，分解細(xì)胞外的纖維素，使得細(xì)胞無可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，其不能合成纖維素酶，不能利用培養(yǎng)基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纖維素碳源不能存活菌株Ⅱ中缺少信號(hào)肽編碼序列，導(dǎo)致所產(chǎn)生的纖維素酶無法分泌到細(xì)胞外，分解細(xì)胞外的纖維素，使得細(xì)胞無可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，其不能合成纖維素酶，不能利用培養(yǎng)基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纖維素碳源不能存活。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合；微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．
【答案】B；纖維素酶基因中存在BamHⅠ的酶切位點(diǎn)，因此不能選擇BamHⅠ切割目的基因；只使用PstⅠ切割目的基因和質(zhì)粒，可能出現(xiàn)目的基因或質(zhì)粒的自身連接，因此為使纖維素酶基因能夠與質(zhì)粒有效組合，應(yīng)選用最合適的限制酶是HindⅢ和PstⅠ；菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；質(zhì)粒和酵母菌；菌株Ⅱ中缺少信號(hào)肽編碼序列，導(dǎo)致所產(chǎn)生的纖維素酶無法分泌到細(xì)胞外，分解細(xì)胞外的纖維素，使得細(xì)胞無可利用的碳源，由于菌株Ⅰ中導(dǎo)入的是普通質(zhì)粒，其不能合成纖維素酶，不能利用培養(yǎng)基中的碳源，因此菌株Ⅰ和菌株Ⅱ因不能利用纖維素碳源不能存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：2引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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