人類胰島素基因位于第11號染色體上，長度8416bp,包含3個外顯子和2個內(nèi)含子，人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣嚓P(guān)問題：
（1）如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是從基因文庫獲取或人工合成從基因文庫獲取或人工合成。
（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
（3）經(jīng)過33輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，需要引物A3131個，從PCR的過程和DNA分子的特點，試著寫出設(shè)計引物需要注意的問題引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴增DNA內(nèi)有過多互補的序列引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴增DNA內(nèi)有過多互補的序列（答出2點即可）。
（4）利用SDS-凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速度取決于DNA分子的大小DNA分子的大小。
（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達載體后導(dǎo)入大腸桿菌，能不能表達出人胰島素，判斷并說明理由不能，因為此方法獲得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤不能，因為此方法獲得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】從基因文庫獲取或人工合成；四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；3；31；引物自身不能有互補序列 引物之間不能有互補序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴增DNA內(nèi)有過多互補的序列；DNA分子的大??；不能，因為此方法獲得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/23 20:38:36組卷：29引用：4難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導(dǎo)入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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