油菜是我國重要的油料作物，黃籽油菜比黑籽油菜的含油量更高，色素積累更少，但我國主栽的 甘藍型油菜缺乏天然的黃籽種質(zhì)資源。研究表明，TT8基因作為一個重要的基因參與了黃籽性狀的形 成。科研人員首次利用CRISPR/Cas9技術(shù)對甘藍型油菜中的BnaTT8基因進行定點突變改造（如圖1），PCR擴增BnaTT8基因，構(gòu)建基因表達載體（如圖2），再將重組質(zhì)粒通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入受體甘藍型油 菜甲9707（J9707）中，創(chuàng)建甘藍型油菜黃籽突變體，CRISPR/Cas9介導(dǎo)的BnaTT8基因突變可以顯著提高種子的含油量和蛋白質(zhì)含量，使得用甘藍型油菜種子生產(chǎn)的菜籽油的營養(yǎng)價值更高。請回答下列問題：

（1）圖1中向?qū)NA與BnaTT8基因按照 

堿基互補配對

堿基互補配對

原則特異性結(jié)合，Cas9蛋白切割BnaTT8基因使a鏈和互補鏈中的 

磷酸二酯鍵

磷酸二酯鍵

 斷裂，通過隨機增添、刪除或替換部分堿基對，獲得所需目的基因。
（2）PCR擴增目的基因的原理是 

DNA半保留復(fù)制

DNA半保留復(fù)制

，需要根據(jù)所需的BnaTT8基因設(shè)計引物，引物在DNA復(fù)制中的作用是 

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

。為保證BnaTT8基因正確插入質(zhì)粒中，需要在引物的 

5'端

5'端

 （填“3'端”或“5'端”）添加限制酶的識別序列。
（3）圖2字母A～E表示不同限制酶的切割位點，構(gòu)建基因表達載體時，將BnaTT8基因插入 

C

C

（ 填 字母）處，目的是

保證BnaTT8基因可以在J9707的細胞中表達

保證BnaTT8基因可以在J9707的細胞中表達

。重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞后，可在個體水平上通過 

測定（純合）突變體成熟種子的含油量和蛋白質(zhì)含量

測定（純合）突變體成熟種子的含油量和蛋白質(zhì)含量

 來鑒定BnaTT8基因是否表達。
（4）基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)強大的精確編輯植物基因組的能力，CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)已經(jīng)成為農(nóng)業(yè)中的一個強有力的工具，科研人員在CRISPR/Cas9的基礎(chǔ)上進行改造，開發(fā)出了可以精準實現(xiàn)多種堿基替換和大片段插入和刪除的基因編輯工具。請寫出CRISPR/Cas9及其改造的產(chǎn)品在科學(xué)研究中的應(yīng)用：

對基因進行定點突變，抑制有害基因或致病基因的表達；利用基因編輯技術(shù)對作物的淀粉含量、香味、營養(yǎng)價值和貯藏品質(zhì)等品質(zhì)性狀進行改良或精確地去除生產(chǎn)上無用或不理想的性狀

對基因進行定點突變，抑制有害基因或致病基因的表達；利用基因編輯技術(shù)對作物的淀粉含量、香味、營養(yǎng)價值和貯藏品質(zhì)等品質(zhì)性狀進行改良或精確地去除生產(chǎn)上無用或不理想的性狀

（答出一點即可）。