某學(xué)校研究小組準(zhǔn)備克隆含有SLA-2基因的質(zhì)粒，首先構(gòu)建該基因的表達(dá)載體，然后通過大腸桿菌進行克隆重組質(zhì)粒，過程如圖1所示，下表為不同限制酶的識別序列及切割位點。請回答下列問題：
| 限制酶 | BclⅠ | NotⅠ | XbaⅠ | Sau3AⅠ |
| 識別序列及切割位點 | T↓GATCA | GC↓GGCCGC | T↓CTAGA | ↓GATC |
（1）圖1過程①中，PCR擴增SLA-2基因需要的酶是
耐高溫的DNA聚合酶
耐高溫的DNA聚合酶
需要 2
2
種引物參與。（2）在進行圖1的②過程之前，需切割目的基因和質(zhì)粒，選用的限制酶是
NotⅠ、XbaⅠ
NotⅠ、XbaⅠ
，③過程初步篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在含 氨芐青霉素
氨芐青霉素
（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。（3）在培養(yǎng)大腸桿菌前，檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格的操作是
將未接種的培養(yǎng)基放在適宜溫度恒溫箱中（倒置）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成
將未接種的培養(yǎng)基放在適宜溫度恒溫箱中（倒置）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成
。用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細(xì)菌數(shù)目時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往 少于
少于
（填“多于”或“少于”）稀釋液中的活菌數(shù)，原因是 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落
。若其中一個平板的菌落分布如圖2，推測該同學(xué)接種時可能的操作失誤是 涂布不均勻
涂布不均勻
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】耐高溫的DNA聚合酶；2；NotⅠ、XbaⅠ；氨芐青霉素；將未接種的培養(yǎng)基放在適宜溫度恒溫箱中（倒置）培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成；少于；當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；涂布不均勻
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/24 8:0:9組卷：5引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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