圖甲為構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中的三種備選質(zhì)粒,其中Ap為氨芐青霉素抗性基因,Tc為四環(huán)素抗性基因。圖乙為培育轉(zhuǎn)AFPs基因(抗凍基因)番茄的示意圖,外源DNA和質(zhì)粒上均標(biāo)出了酶切位點及相關(guān)抗性基因,請回答下列問題。
(1)圖甲中通常選用質(zhì)粒C構(gòu)建重組質(zhì)粒,不選用質(zhì)粒A的原因是 質(zhì)粒A中沒有標(biāo)記基因質(zhì)粒A中沒有標(biāo)記基因;復(fù)制原點處A和T特別多,其分子機理是 氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結(jié)合,作為復(fù)制起點氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結(jié)合,作為復(fù)制起點,不選用質(zhì)粒B構(gòu)建重組質(zhì)粒的原因是 質(zhì)粒B的復(fù)制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復(fù)制原點質(zhì)粒B的復(fù)制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復(fù)制原點。
(2)據(jù)圖乙分析,若成功構(gòu)建重組質(zhì)粒以利于篩選鑒定,應(yīng)優(yōu)先選用的兩種限制酶分別是 BamHⅠBamHⅠ和 HindⅢHindⅢ切割目的基因和質(zhì)粒,采用兩種限制酶的另一優(yōu)點是 避免目的基因和質(zhì)粒被切割后自身環(huán)化避免目的基因和質(zhì)粒被切割后自身環(huán)化。
(3)PCR技術(shù)的原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制,通過PCR技術(shù)獲取目的基因時需設(shè)計 22種引物,引物是一小段 能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸。
(4)圖乙農(nóng)桿菌中的質(zhì)粒應(yīng)含有T-DNA,其作用是 攜帶目的基因進入番茄細(xì)胞并整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA攜帶目的基因進入番茄細(xì)胞并整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA。若要獲得抗凍能力更強的抗凍番茄,可以對AFPs基因進行改造,最終得到相應(yīng)的蛋白質(zhì),該過程需用到 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)工程。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】質(zhì)粒A中沒有標(biāo)記基因;氫鍵相對少,不穩(wěn)定,DNA容易解旋,容易和引物結(jié)合,作為復(fù)制起點;質(zhì)粒B的復(fù)制原點中含有HindⅢ酶切位點,如選用HindⅢ酶作為限制酶,會破壞復(fù)制原點;BamHⅠ;HindⅢ;避免目的基因和質(zhì)粒被切割后自身環(huán)化;DNA半保留復(fù)制;2;能與DNA母鏈的一段堿基序列互補配對的短單鏈核酸;攜帶目的基因進入番茄細(xì)胞并整合到番茄細(xì)胞的染色體DNA;蛋白質(zhì)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/10 8:0:9組卷:0引用:1難度:0.5
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