四環(huán)素是放線菌產(chǎn)生的一種廣譜抗生素,既可以用來進行動物疾病的治療,還可以作為飼料的添加劑促進動物生長。然而,四環(huán)素的化學結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,在動物體內(nèi)并不能被完全吸收轉(zhuǎn)化,大部分以原藥形式排出體外,易在環(huán)境中積累,造成污染。研究人員從養(yǎng)雞場糞便堆肥中篩選獲得兩株對四環(huán)素具有一定降解能力的菌株,并探究其對四環(huán)素降解的最佳條件,為修復及治理被四環(huán)素污染的環(huán)境提供菌種資源和理論依據(jù)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)為篩選出四環(huán)素降解菌,從飼料中添加 四環(huán)素四環(huán)素的養(yǎng)雞場糞便中取5g樣品,加入無菌水制成懸液接種至適宜的液體培養(yǎng)基中,置于30℃、160t/min搖床恒溫振蕩培養(yǎng),此操作的目的是 增加四環(huán)素降解菌的濃度增加四環(huán)素降解菌的濃度。
(2)培養(yǎng)結(jié)束后對培養(yǎng)液進行梯度稀釋,從不同稀釋倍數(shù)的稀釋液中各吸取100μL稀釋液,涂布于含有一定濃度四環(huán)素的選擇培養(yǎng)基上。待長出單菌落,挑選菌落形態(tài)外觀不同的單菌落直接用 平板劃線平板劃線法進一步分離純化。若要臨時保藏菌種,可將其接種到試管的 固體斜面培養(yǎng)基固體斜面培養(yǎng)基上,待長成菌落后再置于4℃冰箱中保藏,以備后續(xù)實驗。
(3)分離得到兩種對四環(huán)素具有降解能力的菌種A和B。為研究不同碳源和氮源時,兩種菌對四環(huán)素降解能力的影響,在含適宜濃度的四環(huán)素的無機鹽培養(yǎng)基中分別加入1%不同碳源活氮源作為實驗組,不加碳源或氮源的作為對照組,6d后測定四環(huán)素殘留量結(jié)果如圖所示:
①四環(huán)素可為能降解四環(huán)素的微生物提供碳源,碳源可為微生物的生長提供 能量和合成其他物質(zhì)的原料能量和合成其他物質(zhì)的原料(答出兩點);分析可知,在碳源和氮源分別為 蔗糖和蛋白胨蔗糖和蛋白胨時,A菌降解四環(huán)素的能力最高;添加蔗糖對B菌降解四環(huán)素具有 促進促進作用。
②為保證實驗的嚴謹性,本實驗還需要再添加一組對照實驗,該對照實驗的設置為 不添加碳源、氮源和四環(huán)素降解菌不添加碳源、氮源和四環(huán)素降解菌。
【答案】四環(huán)素;增加四環(huán)素降解菌的濃度;平板劃線;固體斜面培養(yǎng)基;能量和合成其他物質(zhì)的原料;蔗糖和蛋白胨;促進;不添加碳源、氮源和四環(huán)素降解菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:101引用:4難度:0.7
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(1)為獲得單菌落,可采用平板劃線法或
A.細胞膜 B.核糖體 C.擬核 D.莢膜
(2)表中培養(yǎng)液pH均為6.0,若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進行測定,則應選用表中的
①缺少
②具有
③缺乏
表 試驗用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
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g/L
g/L
g/Lg/L B
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g/L
g/L
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g/LC __ __
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g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
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