人類胰島素基因位于第11號(hào)染色體上，長度為8416bp,人類胰島素的氨基酸序列已知。回答下列相關(guān)問題。
（1）如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是 從基因文庫獲取或人工合成從基因文庫獲取或人工合成。
（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有 四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。
（3）至少經(jīng)過 33輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個(gè)DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán)，需要引物A 3131個(gè)，從PCR的過程和DNA分子的特點(diǎn)，試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問題：引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列（答出2點(diǎn)即可）。
（4）利用瓊脂糖凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速率與 凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象，（寫出3點(diǎn)）等有關(guān)。
（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌，不能不能（填“能”或“不能”）表達(dá)出人胰島素，理由是 因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；基因工程的操作過程綜合．
【答案】從基因文庫獲取或人工合成；四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；3；31；引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列；引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列；凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象；不能；因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/22 8:0:10組卷：5引用：1難度：0.6
相似題
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1．科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1，SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答：
（1）過程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
2．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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