人胰島素基因表達的最初產物是一條肽鏈構成的前胰島素原，經加工后形成兩條肽鏈（A鏈和B鏈）的有生物活性的胰島素。此后科學家又提出了利用基因工程改造大腸桿菌生產人胰島素的兩種方法：“AB”法是根據(jù)胰島素A、B兩條肽鏈的氨基酸序列人工合成兩種DNA片段，利用工程菌分別合成兩條肽鏈后將其混合自然形成胰島素；“BCA”法是利用人體某細胞中的mRNA得到胰島素基因，表達出胰島素原后再用特定酶切掉C肽段。這兩種方法使用同一種質粒作為載體。請據(jù)如圖分析并回答下列問題：
（1）“BCA”法是利用人體 胰島B胰島B細胞中的mRNA，再由mRNA經 逆轉錄逆轉錄得到的胰島素基因，AB和BCAAB和BCA（填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”）法獲取的目的基因中不含人胰島素基因啟動子。
（2）如圖是利用基因工程生產人胰島素過程中使用的質粒及目的基因的部分結構。為使目的基因與載體正確連接，在設計PCR引物時可添加限制酶 XhoΙ和MunΙXhoΙ和MunΙ的識別序列，PCR引物應該添加在識別序列的 3'3'（填“3′”或“5′”）端。通過上述方法獲得人的胰島素基因后，需要通過PCR技術進行擴增，若計劃用1個胰島素基因為模板獲得m（m大于2）個胰島素基因，則消耗的引物總量是 2m-22m-2個。模板序列中的GC含量越高，對PCR過程中的 變性變性步驟（寫出具體過程）影響最大，越 不利于不利于（填“有利于”或“不利于”）目標DNA的擴增。
（3）PCR擴增的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，下列敘述中正確的有 BCDBCD。
A．PCR反應體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶主要在退火過程起作用
B．待測樣品中DNA分子的大小和構象、凝膠的濃度等都會影響DNA在電泳中的遷移速率
C．進行電泳時，帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動
D．瓊脂糖溶液中加入的核酸染料利于DNA在紫外燈下被檢測
（4）β-半乳糖苷酶可以分解無色的X-gal產生藍色物質使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落為白色。經 鈣離子處理鈣離子處理處理大腸桿菌后，與重組質?；旌吓囵B(yǎng)一段時間，將大腸桿菌接種到添加了 氨芐青霉素氨芐青霉素和X-gal的培養(yǎng)基上篩選出 白白色的菌落即為工程菌種。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】胰島B；逆轉錄；AB和BCA；XhoΙ和MunΙ；3'；2m-2；變性；不利于；BCD；鈣離子處理；氨芐青霉素；白
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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