CAR-T 療法對復(fù)發(fā)、難治性腫瘤患者表現(xiàn)出了突破性療效。CAR-T 療法是指通過基因修飾技術(shù)，將帶有特異性抗原識別結(jié)構(gòu)域及T細胞激活信號的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入T細胞，使T細胞直接與腫瘤細胞表面的特異性抗原相結(jié)合而被激活，通過釋放穿孔素、顆粒酶素B等直接殺傷腫瘤細胞?；卮鹣铝袉栴}：
（1）惡性腫瘤的發(fā)生是因為免疫系統(tǒng)的

免疫監(jiān)視

免疫監(jiān)視

功能下降，并且由于腫瘤細胞表面的

糖蛋白

糖蛋白

減少，細胞黏著度降低，易于其轉(zhuǎn)移和分散。
（2）CAR-T的主要流程如圖所示。
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①采集血細胞、獲取患者T細胞：體外培養(yǎng)T細胞的時候合成培養(yǎng)基中常需要加入

血清（血漿）

血清（血漿）

等天然成分，并且會通入一定量的CO₂，通入CO₂的主要作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
②制備CAR-T細胞：為了實現(xiàn)目的基因在T細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，其作用是

讓CAR基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代

讓CAR基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代

，這個過程中需要用到的工具酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（3）將改造后的CAR-T細胞回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，通常不會產(chǎn)生免疫排斥，原因是

以患者自身的T細胞制備得到的CAR-T細胞不屬于“非己”成分，不會引起患者免疫系統(tǒng)的攻擊

以患者自身的T細胞制備得到的CAR-T細胞不屬于“非己”成分，不會引起患者免疫系統(tǒng)的攻擊

。
（4）回輸?shù)交颊唧w內(nèi)的 CAR-T細胞還能釋放細胞因子，通過增加體內(nèi)免疫細胞數(shù)量來殺傷腫瘤細胞，而且可形成記憶T細胞，從而獲得特異性的抗腫瘤長效機制。目前臨床上主要采用的第二代CAR-T療法過程中可能會產(chǎn)生過量的細胞因子。根據(jù)上述信息，請簡略說明目前第二代CAR-T臨床上的局限性：

CAR-T細胞轉(zhuǎn)入人體后可能會釋放過量細胞因子，導(dǎo)致T細胞的過度增殖分化，進而攻擊患者自身的組織和器官

CAR-T細胞轉(zhuǎn)入人體后可能會釋放過量細胞因子，導(dǎo)致T細胞的過度增殖分化，進而攻擊患者自身的組織和器官

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