重組PCR技術(shù)是一項(xiàng)新的PCR技術(shù)，通過(guò)重組PCR技術(shù)能將兩個(gè)不同的DNA連接成為一個(gè)新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴(kuò)增得到LTB和ST1兩個(gè)基因片段，利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB—ST1融合基因，制備過(guò)程如圖1所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中，向反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)除了引物和模板鏈，還需要加入 耐高溫DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸耐高溫DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸。
（2）從P2，P3兩種引物的角度分析，LTB和ST1基因能夠融合的關(guān)鍵是 這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)。PCR1和PCR2不能在同一個(gè)反應(yīng)體系中進(jìn)行，原因是 P2和P3能結(jié)合，會(huì)干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過(guò)程P2和P3能結(jié)合，會(huì)干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過(guò)程。②過(guò)程不需要加入引物，原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物兩條母鏈可作為合成子鏈的引物。
（3）科研小組為了檢測(cè)是否成功構(gòu)建出融合基因，將反應(yīng)后體系中的各種DNA分子進(jìn)行電泳，結(jié)果如圖2所示。則融合基因最可能是 33，判斷依據(jù)是 融合基因包含2個(gè)不同的基因，其分子量較大，3表示的DNA分子量最大融合基因包含2個(gè)不同的基因，其分子量較大，3表示的DNA分子量最大。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】耐高溫DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸；這兩種引物的部分區(qū)域能進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)；P2和P3能結(jié)合，會(huì)干擾引物和模板鏈的結(jié)合，影響PCR過(guò)程；兩條母鏈可作為合成子鏈的引物；3；融合基因包含2個(gè)不同的基因，其分子量較大，3表示的DNA分子量最大
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/8/8 8:0:9組卷：13引用：2難度：0.7
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1．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說(shuō)法正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1，SLA-2基因長(zhǎng)度為1100bp,質(zhì)粒B的總長(zhǎng)度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答：
（1）過(guò)程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過(guò)程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過(guò)程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒(méi)有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過(guò)程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測(cè)腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測(cè)其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
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