我國(guó)科學(xué)家從某種細(xì)菌中提取抗蟲(chóng)基因,轉(zhuǎn)入煙草并培育成抗蟲(chóng)煙草。如圖是轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)煙草的培育過(guò)程,圖中箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向,三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是:Bg/II (A↓GATCT)、EcoRI(G↓AATTC)、HindIII (A↓AGCTT)?;卮鹣铝袉?wèn)題:
(1)Bg/II、EcoRI、HindIII等限 制性核酸內(nèi)切酶主要是從 原核生物原核生物獲得,這些酶并不切割自身DNA分子的原因可能是 自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列(或識(shí)別序列甲基化)自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列(或識(shí)別序列甲基化)。
(2 )培育該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)煙草的核心工作是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建,根據(jù)圖示可知,應(yīng)選用限制酶EcoRI和HindIII處理目的基因,不使用限制酶Bg/II和EcoRI、Bg/II和HindIII切割目的基因原因分別是 可能不能獲得目的基因可能不能獲得目的基因和 目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄。
(3)將抗蟲(chóng)基因?qū)朕r(nóng)桿菌時(shí),應(yīng)將其插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA,培養(yǎng)過(guò)程①應(yīng)在培養(yǎng)基中添加 卡那霉素卡那霉素。
(4)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)煙草的染色體DNA上是否插入了抗蟲(chóng)基因,常用的方法是 DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】原核生物;自身的基因中不具備這種酶的識(shí)別序列(或識(shí)別序列甲基化);基因表達(dá)載體的構(gòu)建;可能不能獲得目的基因;目的基因和質(zhì)粒DNA發(fā)生反向連接而不能轉(zhuǎn)錄;T-DNA;卡那霉素;DNA雜交技術(shù)、RNA分子雜交技術(shù)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:13引用:1難度:0.7
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