水母體內(nèi)含有綠色熒光蛋白，擬利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將水母的綠色熒光蛋白基因轉(zhuǎn)入矮牽牛中培育綠色熒光矮牽牛。請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：
（1）將水母細(xì)胞破碎后提取mRNAmRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下形成單鏈互補(bǔ)DNA，然后利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，再與pBIN質(zhì)粒連接形成重組質(zhì)粒，并導(dǎo)入大腸桿菌構(gòu)建成cDNA文庫(kù)cDNA文庫(kù)。將文庫(kù)中的大腸桿菌進(jìn)行單菌落分離后，選擇具有綠色熒光綠色熒光的菌落，進(jìn) 而獲得目的基因。
（2）野生pBIN質(zhì)粒不能將其上的DNA片段整合到植物細(xì)胞的染色體DNA上，因此需對(duì)野生pBIN質(zhì)粒進(jìn)行接入T-DNA接入T-DNA的改造。在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用HindⅢ+XbaⅠ聯(lián)合酶切的目的是形成兩種不同的黏性末端，避免重組時(shí)發(fā)生目的基因和質(zhì)粒的反向連接與自身環(huán)化，保證目的基因的正確接入與表達(dá)形成兩種不同的黏性末端，避免重組時(shí)發(fā)生目的基因和質(zhì)粒的反向連接與自身環(huán)化，保證目的基因的正確接入與表達(dá)。
（3）若利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進(jìn)行矮牽牛的活體目的基因?qū)耄ǔＰ鑼?duì)葉片、子葉等感染部位進(jìn)行損傷處理。若將農(nóng)桿菌菌液加在未進(jìn)行損傷處理的腋芽處，也可完成轉(zhuǎn)化，原因是生長(zhǎng)旺盛的腋芽含大量的頂端分生組織，分生組織對(duì)農(nóng)桿菌敏感生長(zhǎng)旺盛的腋芽含大量的頂端分生組織，分生組織對(duì)農(nóng)桿菌敏感。植物組織完成轉(zhuǎn)化后常用抗生素進(jìn)行除菌，選用抗生素種類時(shí)需要考慮農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因。抗生素的使用也會(huì)對(duì)外植體產(chǎn)生一定的毒害作用。如果選用發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)目的基因?qū)?nbsp;的同時(shí)會(huì)引起外植體產(chǎn)生大量的不定根，選擇不定根的根尖根尖進(jìn)行繼代培養(yǎng)2～3次就可在不使用抗生素的情況下獲得無(wú)菌苗。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】mRNA；cDNA文庫(kù)；綠色熒光；接入T-DNA；形成兩種不同的黏性末端，避免重組時(shí)發(fā)生目的基因和質(zhì)粒的反向連接與自身環(huán)化，保證目的基因的正確接入與表達(dá)；生長(zhǎng)旺盛的腋芽含大量的頂端分生組織，分生組織對(duì)農(nóng)桿菌敏感；農(nóng)桿菌所攜帶的抗生素抗性基因；根尖
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：14引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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