如圖為培育鐵含量較高的轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖,其中①~⑥為過程,EeoRI、HindⅢ、BamHI為限制酶,回答下列問題。
(1)獲取鐵合蛋白基因常用的方法有從基因文庫中獲取、化學(xué)法人工合成從基因文庫中獲取、化學(xué)法人工合成(答出2種)和PCR技術(shù)。利用PCR技術(shù)擴增目的基因時,需要在反應(yīng)體系中加入鐵合蛋白基因,dNTP以及引物、Taq酶引物、Taq酶(答出2點)等。
(2)基因表達載體包括鐵合蛋白基因、潮霉素抗性基因、復(fù)制原點以及啟動子、終止子啟動子、終止子(答出2點),其中潮霉素抗性基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因鑒別受體細胞中是否含有目的基因。構(gòu)建基因表達載體時,先需要選用BanHⅠ和HindⅢBanHⅠ和HindⅢ限制酶分別處理Ti質(zhì)粒和鐵合蛋白基因。
(3)該研究過程中,采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將鐵合蛋白基因?qū)胨炯毎?,其利用的農(nóng)桿菌的特點是農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上。
(4)圖中④⑤⑥過程,屬于植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)依據(jù)的基本原理(理論基礎(chǔ))是植物細胞的全能性植物細胞的全能性。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫中獲取、化學(xué)法人工合成;引物、Taq酶;啟動子、終止子;鑒別受體細胞中是否含有目的基因;BanHⅠ和HindⅢ;農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可將目的基因整合到受體細胞的染色體DNA上;植物組織培養(yǎng);植物細胞的全能性
【解答】
【點評】
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