人乳鐵蛋白（hLF）對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等有抑制作用。研究人員開展了如圖所示的有關(guān)人乳鐵蛋白基因的研究，圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶的切割位點(diǎn)，neoR為新霉素抗性基因，BLG基因?yàn)棣?乳球蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答下列問題：
（1）過程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，是因?yàn)?hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不表達(dá)hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不表達(dá)。在RT-PCR過程中，加入的引物需在5′端添加 SalⅠSalⅠ和 BamHⅠBamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列，以便于hLF基因插入pEB質(zhì)粒中。
（2）過程②中，hLF基因插入BLG基因之后的目的是 使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)。過程③中，使用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，依據(jù)的主要原理是 生物膜具有流動(dòng)性生物膜具有流動(dòng)性。
（3）利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞 是否發(fā)綠色熒光是否發(fā)綠色熒光，以篩選出轉(zhuǎn)化成功的細(xì)胞。
（4）要獲得轉(zhuǎn)基因山羊，還需要將hLF基因成功表達(dá)的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊 去核的卵母去核的卵母細(xì)胞中，再借助 早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)和 胚胎移植胚胎移植技術(shù)培育出轉(zhuǎn)基因山羊。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不表達(dá)；SalⅠ；BamHⅠ；使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)；生物膜具有流動(dòng)性；是否發(fā)綠色熒光；去核的卵母；早期胚胎培養(yǎng)；胚胎移植
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/18 8:0:10組卷：8引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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