如表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關(guān)限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復(fù)標注。請回答下列問題：
| 限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
| 識別序列及切割位點 |
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（1）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用
BclI和HindⅢ
BclI和HindⅢ
兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴增重組質(zhì)粒，需將其轉(zhuǎn)入處于感受
感受
態(tài)的大腸桿菌。（2）為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌，應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
。（3）若BamH I酶切的DNA末端與Bcl I酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為
都不能
都不能
（填“都能”、“都不能”或“只有一種能”）切開。（4）假設(shè)所用的酶均可將識別位點完全切開，若用Sau3A I切圖1質(zhì)粒，能獲得
3
3
種大小不同的DNA片段。（5）常用PCR技術(shù)擴增目的基因，所用的引物組成為圖2中
引物甲和引物丙
引物甲和引物丙
。該PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含：擴增緩沖液（含Mg2+）、水、引物、模板DNA、4種脫氧核糖苷酸
4種脫氧核糖苷酸
和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】BclI和HindⅢ；DNA連接；感受；四環(huán)素；；都不能；3；引物甲和引物丙；4種脫氧核糖苷酸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
；都不能；3；引物甲和引物丙；4種脫氧核糖苷酸；熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：50引用：5難度：0.5
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
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