潮汕生腌海鮮是潮汕等地區(qū)一種獨(dú)特的海鮮做法,通常將瀨尿蝦洗凈切段后用生姜、香菜、蒜、小米椒等配料腌制半小時(shí)即可食用。經(jīng)查閱,生吃海鮮會(huì)有感染沙門氏菌等食源性致病菌的風(fēng)險(xiǎn)?;卮鹣铝袉栴}:
(1)參照食品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn),先將瀨尿蝦樣品接種在亞硫酸鉍瓊脂(BS)培養(yǎng)基上初篩出疑似菌落。BS培養(yǎng)基中煌綠和亞硫酸鈉能抑制或阻止大腸桿菌、變形桿菌和革蘭氏陽性菌等的生長,沙門氏菌能正常生長。該培養(yǎng)基屬于 選擇選擇(填“選擇”或“鑒別”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基中添加磷酸氫二鈉的作用是 提供無機(jī)鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質(zhì)提供無機(jī)鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質(zhì)。(寫出2點(diǎn)即可)
(2)利用沙門氏菌特有的基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增可以確定疑似菌落是否為沙門氏菌,下表為某同學(xué)設(shè)計(jì)的3對(duì)擴(kuò)增引物,引物在 復(fù)性/退火復(fù)性/退火階段與模板結(jié)合。分別用這3對(duì)引物進(jìn)行PCR后用凝膠電泳進(jìn)行檢驗(yàn),其他條件均相同,引物②組的電泳出現(xiàn)圖2示結(jié)果的原因是 自身存在互補(bǔ)序列,降低了引物與模板結(jié)合的有效性,未能擴(kuò)展出目的基因自身存在互補(bǔ)序列,降低了引物與模板結(jié)合的有效性,未能擴(kuò)展出目的基因。
引物 | 引物序列 | 預(yù)測(cè)產(chǎn)物/bp |
① | F:5′-GTCACGGTGATCGATCCGGT-3′ R:5′-CACGATATTGATATTAGcCcG-3′ |
852 |
② | F:5′-GAAACGTTCCTTCGGAACGTTTC-3′ R:5′-CTGAACGGTCATCCGTTTCTG-3′ |
894 |
③ | F:5′-CCTGGCACCTCGCGCTATAC-3′ R:5′-CCACACACGGATCGTGGCG-3′ |
826 |
稀釋涂布平板
稀釋涂布平板
法接種的5組沙門氏菌平板上。若某組平板上 濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
,則對(duì)應(yīng)配料的抑制效果最好。【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;微生物的純培養(yǎng).
【答案】選擇;提供無機(jī)鹽、維持滲透壓、pH緩沖物質(zhì);復(fù)性/退火;自身存在互補(bǔ)序列,降低了引物與模板結(jié)合的有效性,未能擴(kuò)展出目的基因;稀釋涂布平板;濾紙片周圍不長菌落的“抑菌圈”平均直徑最大
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:1難度:0.5
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2.科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因(SLA-2基因),構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體,進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1,SLA-2基因長度為1100bp,質(zhì)粒B的總長度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答:
限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
(2)過程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是
(3)若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳,請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
(4)科研中常用呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選,一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是:既可以讓大部分沒有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓
(5)過程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測(cè)腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽,其原理是發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:41引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn),說法錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/15 6:30:1組卷:3引用:1難度:0.6
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