綠色熒光蛋白是科學(xué)家在水母細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)的由238個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)，被廣泛應(yīng)用于分子示蹤和生物標(biāo)記。科研人員利用基因工程獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，再通過發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)綠色熒光蛋白。請(qǐng)回答下列問題：
（1）利用PCR從水母基因組中擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因時(shí)，需要加入水母基因組DNA、引物、4種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶耐高溫的DNA聚合酶緩沖液等物質(zhì)，其中引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
（2）獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌的核心步驟是 基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過程所需要的酶有 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。
（3）為提高轉(zhuǎn)化效率，轉(zhuǎn)化前需用 Ca2+Ca2+對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理。
（4）利用轉(zhuǎn)基因大腸桿菌生產(chǎn)綠色熒光蛋白時(shí)，培養(yǎng)基應(yīng)選用 液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基（填“液體培養(yǎng)基”或“固體培養(yǎng)基”），pH應(yīng)調(diào)至 中性或弱堿性中性或弱堿性。
【考點(diǎn)】基因表達(dá)載體的構(gòu)建；基因工程的操作過程綜合．
【答案】耐高溫的DNA聚合酶；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；限制酶、DNA連接酶；Ca2+；液體培養(yǎng)基；中性或弱堿性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：17引用：1難度：0.7
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