人心肌細胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。請回答相關(guān)問題:
(1)動物細胞培養(yǎng)時,可以用 胰蛋白酶(膠原蛋白酶)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)酶處理動物組織,得到分散的組織細胞,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸、生長因子等必要的營養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的 動物血清動物血清,以滿足動物細胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要。動物細胞培養(yǎng)應在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH。
(2)為了刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的B淋巴細胞,每隔2周用cTnI作為 抗原抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細胞懸液與骨髓瘤細胞誘導融合,常用的化學誘導劑是 聚乙二醇 (PEG)聚乙二醇 (PEG)。為了獲得雜交瘤細胞,應將甲放在 (HAT)選擇性(HAT)選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。②過程表示將乙細胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進行 抗體抗體檢測,之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測,并多次重復上述操作,其目的是篩選獲得抗cTnI抗體產(chǎn)量大、純度高的雜交瘤細胞丙。通過該技術(shù)獲得的單抗特點是 特異性強、靈敏度高特異性強、靈敏度高。
(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學上常用的定量檢測抗原的方法,具體原理如圖2示:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標抗體均能與同一抗原結(jié)合,這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測方法中,酶標抗體的作用是 與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解。
【答案】胰蛋白酶(膠原蛋白酶);動物血清;維持培養(yǎng)液的pH;抗原;聚乙二醇 (PEG);(HAT)選擇性;抗體;特異性強、靈敏度高;與待測抗原結(jié)合,酶催化底物水解
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/5/21 8:0:9組卷:9引用:1難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6~5倍,導致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱??茖W家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
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(1)與植物體細胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細胞,還需進行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
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