我國(guó)傳統(tǒng)藥材三七具有重要的藥用價(jià)值。研究三七原生質(zhì)體的制備可為三七良種快速培育奠定基礎(chǔ)。原生質(zhì)體是除去細(xì)胞壁后的活性植物細(xì)胞,通常采用酶解細(xì)胞壁的方法制備。某育種團(tuán)隊(duì)為探究纖維素酶和果膠酶的配比對(duì)三七原生質(zhì)體活力的影響,開(kāi)展了如下實(shí)驗(yàn):
【實(shí)驗(yàn)假設(shè)】纖維素酶和果膠酶的配比會(huì)影響三七原生質(zhì)體的活力。
【實(shí)驗(yàn)過(guò)程】
Ⅰ.通過(guò)組織培養(yǎng)獲得三七愈傷組織,挑選生長(zhǎng)良好、狀態(tài)一致的愈傷組織備用。
Ⅱ.用緩沖液配制纖維素酶和果膠酶不同配比的混合液各10mL共,共9組。
Ⅲ.分別向各組加入1g于愈傷組織,置于25℃解搖床上振蕩酶解6小時(shí)。
Ⅳ.分離、純化原生質(zhì)體,顯微觀察,測(cè)量原生質(zhì)體活力,結(jié)果如表2所示:
【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
表2 兩種酶不同配比對(duì)三七原生質(zhì)體活力的影響
組別 | 一 | 二 | 三 | 四 | 五 | 六 | 七 | 八 | 九 |
纖維素酶濃度(mg/mL) | 10 | 10 | 10 | 15 | 15 | 15 | 20 | 20 | 20 |
果膠酶濃度(mg/mL) | 5 | 7 | 9 | 5 | 7 | 9 | 5 | 7 | 9 |
原生質(zhì)體活力(%) | 40.9 | 46.3 | 45.8 | 52.7 | 59.6 | 50.9 | 36.7 | 33.7 | 23.1 |
(1)從表2可以看出,制取原生質(zhì)體活力最高的酶配比組別是
五
五
。原生質(zhì)體具有活力的表現(xiàn)之一,是其對(duì)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞具有 選擇透過(guò)
選擇透過(guò)
性。(2)緩沖液具有調(diào)節(jié)溶液pH的作用,從而使實(shí)驗(yàn)中的酶保持較高的
催化活性
催化活性
。重復(fù)本實(shí)驗(yàn)時(shí),有人錯(cuò)把蒸餾水當(dāng)成緩沖液進(jìn)行酶混合液的配制,導(dǎo)致原生質(zhì)體漲破,其漲破原因是 原生質(zhì)體(或細(xì)胞)滲透吸水
原生質(zhì)體(或細(xì)胞)滲透吸水
。(3)有團(tuán)隊(duì)成員認(rèn)為應(yīng)該進(jìn)一步優(yōu)化酶解時(shí)長(zhǎng),而且在檢驗(yàn)結(jié)果時(shí)還應(yīng)該考慮原生質(zhì)體的產(chǎn)量。于是該團(tuán)隊(duì)繼續(xù)研究了酶解時(shí)長(zhǎng)對(duì)原生質(zhì)體活力及產(chǎn)量的影響,結(jié)果如圖所示:
①這個(gè)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中,因變量為
原生質(zhì)體活力和產(chǎn)量
原生質(zhì)體活力和產(chǎn)量
;②根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最佳酶解時(shí)長(zhǎng)
8
8
是小時(shí),原因是 酶解時(shí)長(zhǎng)8小時(shí),既保證原生質(zhì)體的活力,也兼顧原生質(zhì)體的產(chǎn)量
酶解時(shí)長(zhǎng)8小時(shí),既保證原生質(zhì)體的活力,也兼顧原生質(zhì)體的產(chǎn)量
。【考點(diǎn)】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及應(yīng)用.
【答案】五;選擇透過(guò);催化活性;原生質(zhì)體(或細(xì)胞)滲透吸水;原生質(zhì)體活力和產(chǎn)量;8;酶解時(shí)長(zhǎng)8小時(shí),既保證原生質(zhì)體的活力,也兼顧原生質(zhì)體的產(chǎn)量
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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