蘇云金芽孢桿菌是一種常用的生物殺蟲劑，其表達(dá)的Bt晶體蛋白能毒殺某些鱗翅目昆蟲。如圖表示培養(yǎng)轉(zhuǎn)Bt基因棉花試管苗的基本操作過程?；卮鹣铝袉栴}：
（1）Bt基因序列已知，常用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增，該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。利用PCR擴(kuò)增目的基因的過程中，某個時間段反應(yīng)體系的溫度需要控制在90～95℃，目的是 使DNA雙鏈解螺旋使DNA雙鏈解螺旋。
（2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，需要將Bt基因插入到Ti質(zhì)粒的 T-DNAT-DNA中。將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法基因槍法和 花粉管通道法花粉管通道法。若要檢測成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的Bt基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，常采用 分子雜交分子雜交技術(shù)。
（3）由步驟Ⅲ到步驟Ⅳ形成愈傷組織，經(jīng)歷了 脫分化脫分化（填過程），再經(jīng)過再分化形成胚狀體，進(jìn)而發(fā)育成幼苗。在生態(tài)環(huán)境方面，與普通棉花相比，種植該轉(zhuǎn)基因棉花的優(yōu)點(diǎn)是 可減少農(nóng)藥的使用，從而減少環(huán)境污染可減少農(nóng)藥的使用，從而減少環(huán)境污染。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】DNA雙鏈復(fù)制；使DNA雙鏈解螺旋；T-DNA；基因槍法；花粉管通道法；分子雜交；脫分化；可減少農(nóng)藥的使用，從而減少環(huán)境污染
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：2難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因，還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物，突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān)，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該P(yáng)CR擴(kuò)增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應(yīng)中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是。
（3）如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞，將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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