噬菌體抗體庫技術(shù)可以制備單克隆抗體，其方法是將人的抗體基因插入噬菌體載體，以大腸桿菌作為受體細(xì)胞進(jìn)行表達(dá)。抗體可能以與外殼蛋白融合表達(dá)的形式位于噬菌體表面，也可能以分泌表達(dá)的方式胞外排出?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲取人的抗體基因可從活化的B細(xì)胞中提取人的抗體基因的mRNA人的抗體基因的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。擴(kuò)增時(shí)，反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是將溫度加熱至90℃～95℃將溫度加熱至90℃～95℃。
（2）體外重組的質(zhì)?？赏ㄟ^Ca2+參與的轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞；而體外重組的噬菌體DNA，理論上可以不利用Ca2+處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，依據(jù)是噬菌體可以侵染大腸桿菌，可將重組DNA分子注入大腸桿菌噬菌體可以侵染大腸桿菌，可將重組DNA分子注入大腸桿菌。
（3）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止抗體被降解，在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。
（4）從噬菌體抗體庫中篩選特異性抗體的方法是抗原-抗體雜交技術(shù)抗原-抗體雜交技術(shù)，其原理是抗原和抗體特異性結(jié)合抗原和抗體特異性結(jié)合。與利用雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體相比，噬菌體抗體庫技術(shù)省去了動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞融合操作，使制備的流程更簡單。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】人的抗體基因的mRNA；將溫度加熱至90℃～95℃；轉(zhuǎn)化；噬菌體可以侵染大腸桿菌，可將重組DNA分子注入大腸桿菌；蛋白酶缺陷型；抗原-抗體雜交技術(shù)；抗原和抗體特異性結(jié)合；動(dòng)物細(xì)胞融合
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：1難度：0.6
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題：
（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長。
（2）對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是（答出一點(diǎn)）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長春堿相比，將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用。抗體一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7
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