科研人員將寒帶地區(qū)海魚體內(nèi)的抗凍基因?qū)肭ъㄒ环N番茄品種)細(xì)胞,成功培育出抗凍千禧果。如圖為培育過程中使用的 Ti質(zhì)粒示意圖,其中 Vir區(qū)的基因活化能促進T-DNA的加工和轉(zhuǎn)移?;卮鹣铝袉栴}:
(1)將抗凍基因的mRNA逆轉(zhuǎn)錄后,再進行PCR可獲得抗凍基因,該過程中所需要的酶是 逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶。每次PCR循環(huán)分為3步。其中所需溫度最低的一步的目的是 使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上。
(2)抗凍基因不能直接導(dǎo)入受體細(xì)胞,需要構(gòu)建抗凍基因表達載體,構(gòu)建抗凍基因表達載體的目的是 有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并遺傳給下一代;有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中表達和發(fā)揮作用有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并遺傳給下一代;有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中表達和發(fā)揮作用(答出1點)。
(3)選擇圖中 Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達載體時,不能選擇限制酶Ⅱ切割 Ti質(zhì)粒。原因是 限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因。最好選擇限制酶 ⅢⅢ構(gòu)建基因表達載體。
(4)為篩選成功導(dǎo)入抗凍基因的千禧果細(xì)胞,最好在培養(yǎng)基中添加 四環(huán)素四環(huán)素,將成功轉(zhuǎn)化的千禧果細(xì)胞誘導(dǎo)培育成植株,最后在 低溫(或寒冷)低溫(或寒冷)條件下篩選出具有抗凍性狀的千禧果植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶;使引物結(jié)合到互補DNA 鏈上;有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并遺傳給下一代;有利于抗凍基因在受體細(xì)胞中表達和發(fā)揮作用;限制酶Ⅱ會破壞Vir區(qū)基因;Ⅲ;四環(huán)素;低溫(或寒冷)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/4 8:0:9組卷:3引用:2難度:0.6
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