單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。
(1)在制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程中,經(jīng)多次篩選獲得能產(chǎn)生單抗X的雜交瘤細(xì)胞,并進(jìn)行體外培養(yǎng),培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液,其目的是 清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。
(2)制備的單抗X與常規(guī)的血清抗體相比,其優(yōu)點(diǎn)是 特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備(至少答出兩點(diǎn))。
(3)為了進(jìn)一步研究單抗X的效果及作用機(jī)制,科學(xué)家開展了如下實(shí)驗(yàn):
實(shí)驗(yàn)一:在體外將單抗X、已知的H7N9抗體Y分別與HA蛋白(H7N9病毒表面的一種蛋白)混合,檢測它們對(duì)HA蛋白的親和力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表所示:(注:KD值越小,抗體和HA蛋白的親和力越高)
抗體種類 | 單抗X | 抗體Y |
KD | 5.32×10-9M | 1.95×10-9M |
①實(shí)驗(yàn)一結(jié)果表明:對(duì)HTN9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是
抗體Y
抗體Y
。②分析實(shí)驗(yàn)一和實(shí)驗(yàn)二的結(jié)果差異,研究人員提出假說:抗體除了中和病毒活性之外,還可以通過結(jié)合巨噬細(xì)胞表面受體,增強(qiáng)其吞噬能力,進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞,單抗X的增強(qiáng)效果比較明顯。
請(qǐng)以巨噬細(xì)胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關(guān)抗體等為材料,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述假說。簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路:
將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中,并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y,一段時(shí)間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比
將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中,并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y,一段時(shí)間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比
。【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】清除代謝產(chǎn)物,防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害;特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備;抗體Y;將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中,并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y,一段時(shí)間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:3難度:0.7
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測抗體性質(zhì),他們測定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
A.向小鼠注入抗原后提取B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 B.可通過將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠細(xì)胞制備嵌合抗體F′ C.據(jù)圖推測,抗體基因序列被替換后改變了與抗原的結(jié)合位點(diǎn) D.在共同作用實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)F′濃度較高時(shí),抗原更多與F′結(jié)合 發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
3.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
A.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除營養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將其置于含有95%O2加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng) C.圖中篩選1的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞 D.若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH,骨髓瘤細(xì)胞的基因型為SS,在兩兩融合后,基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS 發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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