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人體肝臟細(xì)胞中的乙醛脫氫酶2(ALDH2)是人體酒精代謝中的關(guān)鍵酶。如圖表示利用基因工程生產(chǎn)ALDH2過程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu),β-半乳糖苷酶能分解無色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)。圖中氨芐青霉素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因、目的基因的序列中分別含有1種、5種、2種限制酶的識別序列及切割位點。
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(1)構(gòu)建基因表達載體時一般至少需要兩種限制酶,以防止
質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化
質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化
目的基因與質(zhì)粒反向連接
目的基因與質(zhì)粒反向連接
。設(shè)計啟動子的作用是
使目的基因正常轉(zhuǎn)錄(表達)
使目的基因正常轉(zhuǎn)錄(表達)

(2)為了使目的基因與載體能正確連接,應(yīng)在擴增的目的基因A、B兩端分別引入
XhoⅠ
XhoⅠ
MunⅠ
MunⅠ
兩種不同限制酶的識別序列。
(3)MunⅠ酶切后的末端與EcoRⅠ酶切后的末端能連接,原因是
MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同(可以互補配對)
MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同(可以互補配對)

(4)以大腸桿菌為受體細(xì)胞,在篩選插入ALDH2基因成功的受體細(xì)胞時,除營養(yǎng)物質(zhì)外,還要在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)有
氨芐青霉素和X-gal
氨芐青霉素和X-gal
。
(5)研究發(fā)現(xiàn)如果將ALDH2的第36位的氨基酸替換,可提高其催化效率。請寫出通過蛋白質(zhì)工程技術(shù)獲取高效ALDH2基因的操作流程:
從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能(高效ALDH2)出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)(高效ALDH2結(jié)構(gòu))→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列
從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能(高效ALDH2)出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)(高效ALDH2結(jié)構(gòu))→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列

【答案】質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化;目的基因與質(zhì)粒反向連接;使目的基因正常轉(zhuǎn)錄(表達);XhoⅠ;MunⅠ;MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同(可以互補配對);氨芐青霉素和X-gal;從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能(高效ALDH2)出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)(高效ALDH2結(jié)構(gòu))→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/12/7 0:0:1組卷:7引用:2難度:0.5
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  • 1.紅細(xì)胞生成素(EPO)是人體內(nèi)促進紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白,可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限,某科研團隊采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器,使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6
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    (1)獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有
     
    (答出2項)等。
    (2)為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒,應(yīng)該選擇
     
    (填酶)切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入
     
    (填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)對目的基因進行篩選。
    (3)培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程
     
    (填序號)。過程②③采用的方法是
     
    。
    (4)⑤過程需要用到
     
    等植物激素,在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中,這兩種植物激素的比例會發(fā)生變化,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:16引用:5難度:0.5
  • 3.如表為5種限制酶的識別序列及切割位點,如圖為某種質(zhì)粒和目的基因,箭頭所指為限制酶酶切位點?,F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中,以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是( ?。?
    限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ
    識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG
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    發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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