待測藥物在瓊脂平板中擴散使其周圍的細菌生長受到抑制而形成的透明圈叫做抑菌圈。抑菌圈研究法中經(jīng)常使用牛津杯法和打孔法,牛津杯法是將已滅菌的牛津杯置于平板中,打孔法是用已滅菌的打孔器在平板上打孔。某研究小組的實驗流程如圖1?;卮鹣铝袉栴}:
(1)蛋白胨可為微生物的生長提供 碳源、氮源、無機鹽(或維生素)碳源、氮源、無機鹽(或維生素)等營養(yǎng)物質。為了使培養(yǎng)基呈固態(tài),需要加入 凝固劑(瓊脂)凝固劑(瓊脂)。為了防止外來雜菌污染,常常采取 高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌。
(2)預加菌液傾注倒平板是向已冷卻至50℃左右的培養(yǎng)基中注入一定量的菌液,混合均勻后倒平板。倒平板的溫度過高,容易燙傷操作者,還會 殺死培養(yǎng)基中的微生物殺死培養(yǎng)基中的微生物,溫度過低又會導致 培養(yǎng)基快速凝固培養(yǎng)基快速凝固。
(3)將一定的待測藥物接種于牛津杯或小孔中,置于4℃條件下處理2h,目的是 使藥物在培養(yǎng)基上擴散使藥物在培養(yǎng)基上擴散。兩種方法的示意圖如圖2,通過比較抑菌圈,發(fā)現(xiàn)打孔法誤差較小,原因是牛津杯法藥物從表面向四周呈球形擴散,培養(yǎng)基越厚,培養(yǎng)基表面和底部藥物的濃度差異越明顯,導致 培養(yǎng)基不同深度的抑菌圈大小不同培養(yǎng)基不同深度的抑菌圈大小不同,對測量造成一定的影響。
【答案】碳源、氮源、無機鹽(或維生素);凝固劑(瓊脂);高壓蒸汽滅菌;殺死培養(yǎng)基中的微生物;培養(yǎng)基快速凝固;使藥物在培養(yǎng)基上擴散;培養(yǎng)基不同深度的抑菌圈大小不同
【解答】
【點評】
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