引起人類產(chǎn)生埃博拉出血熱的埃博拉病毒（EBOV），是一種單鏈RNA病毒，某研究團隊利用其跨膜表面糖蛋白（GP），以重組腺病毒為載體研發(fā)了埃博拉疫苗。腺病毒是一種DNA病毒，腺病毒載體包括骨架質(zhì)粒（攜帶腺病毒的主要功能基因）和穿梭質(zhì)粒（能轉(zhuǎn)移外源基因到骨架質(zhì)粒上）。如圖為重組埃博拉疫苗制作的部分流程示意圖，已知四種限制性核酸內(nèi)切酶KpnⅠ、BamHⅠ、NheⅠ、BgⅢ的識別序列和酶切位點分別為：GGTAC↓C、G↓GATCC、G↓CTAGC、A↓GATCT．請回答下列問題：
（1）為了判斷是否感染EBOV，利用探針對疑似患者進行核酸檢測，其檢測方法采用了分子雜交分子雜交技術(shù)。為了提高檢測的準確性，需從EBOV核酸中選取具有特異性特異性的序列作為探針設計的模板。
（2）從EBOV基因組中分離出的GP基因不能直接與穿梭質(zhì)粒重組，其原因是GP基因是單鏈RNA結(jié)構(gòu)GP基因是單鏈RNA結(jié)構(gòu)；而過程①獲得的GP基因片段因兩端缺乏相應的限制酶酶切位點相應的限制酶酶切位點也不能直接與穿梭質(zhì)粒重組。研究人員在過程①獲得的GP基因片段下游添加了含“-AGATCT-”的序列，則需在其上游添加包含有-GGTACC--GGTACC-序列的片段，以便與穿梭質(zhì)粒重組，且能避免GP基因反向連接。
（3）實際操作中需利用限制酶將環(huán)狀的重組穿梭質(zhì)粒切成兩個核苷酸片段，則切割前后含有的游離磷酸基團數(shù)目變化為0→40→4。將含GP基因的核苷酸片段與骨架質(zhì)粒通過過程④完成重組，再在含卡那霉素卡那霉素的平板上培養(yǎng)，篩選出含重組骨架質(zhì)粒的陽性菌。
（4）過程⑤中，利用脂質(zhì)體將重組骨架質(zhì)粒導入到人的胚胎腎細胞HEK293中，其運用的原理是膜的流動性膜的流動性，再將成功導入的細胞HK293培養(yǎng)一段時間，獲得大量重組腺病毒，為疫苗的進一步研究奠定基礎。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】分子雜交；特異性；GP基因是單鏈RNA結(jié)構(gòu)；相應的限制酶酶切位點；-GGTACC-；0→4；卡那霉素；膜的流動性
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：31引用：1難度：0.6
相似題
-
1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
相關(guān)試卷