CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可以按照人們的意愿精準(zhǔn)剪切、改變?nèi)我獍谢虻倪z傳信息，對(duì)該研究有突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家被授予2020年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。我國科學(xué)家領(lǐng)銜的團(tuán)隊(duì)利用CRISPR/Cas9等技術(shù)，將人的亨廷頓舞蹈病致病基因（HTT基因）第1外顯子（其中含150個(gè)CAG三核苷酸重復(fù)序列）“敲入”豬基因組內(nèi)，獲得了人-豬“鑲嵌”HTT基因，利用胚胎工程技術(shù)成功地構(gòu)建了亨廷頓舞蹈病的動(dòng)物模型?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR技術(shù)是獲得人HTT基因常用的方法，制備PCR反應(yīng)體系時(shí)，向緩沖溶液中分別加入人HTT基因模板、4種脫氧核糖核苷酸及

引物和Taq酶

引物和Taq酶

等，最后補(bǔ)足H₂O。
（2）CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)中，SgRNA是根據(jù)靶基因設(shè)計(jì)的引導(dǎo)RNA，準(zhǔn)確引導(dǎo)Cas9切割與SgRNA配對(duì)的靶基因DNA序列，由此可見，Cas9在功能上屬于

限制性核酸內(nèi)切

限制性核酸內(nèi)切

酶。與CRISPR/Cas9相比，限制酶的特性決定了其具有

作用對(duì)象單一

作用對(duì)象單一

的局限性。
（3）在實(shí)驗(yàn)過程中，為確認(rèn)實(shí)驗(yàn)豬細(xì)胞基因組內(nèi)是否含有人-豬“鑲嵌”HTT基因，常用的檢測手段包括PCR技術(shù)及

基因探針技術(shù)

基因探針技術(shù)

。
（4）含有“敲入”序列的豬胚胎成纖維細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)通過細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，當(dāng)細(xì)胞貼壁生長到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為

接觸抑制

接觸抑制

。貼滿瓶壁的細(xì)胞常用

胰蛋白酶

胰蛋白酶

進(jìn)行消化處理，以便進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（5）將含有“敲入”序列的豬胚胎成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核導(dǎo)入去核的卵母細(xì)胞的過程稱為

核移植

核移植

。此后進(jìn)行體外胚胎培養(yǎng)并移植到代孕母豬體內(nèi)，最終獲得亨廷頓舞蹈病動(dòng)物模型。