干旱，鹽堿和凍害是限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要逆境因子，胚胎晚期豐富蛋白（LEA）是一類重要的植物細(xì)胞脫水保護(hù)蛋白，在抵御干旱等非生物脅迫過程中發(fā)揮著保護(hù)功能。科研工作者將擬南芥的LEA基因轉(zhuǎn)入小麥體內(nèi)培育轉(zhuǎn)基因耐鹽品系小麥，以提高小麥的抗鹽堿性?；卮鹣铝袉栴}：
（1）為獲取LEA基因，可以從擬南芥細(xì)胞中提取總RNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程得到 cDNAcDNA，再利用 PCRPCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。
（2）在體外人工擴(kuò)增LEA基因的過程中，要控制反應(yīng)體系的溫度變化。加熱至90～95℃的目的是 使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；隨后冷卻至55～60℃，再加熱至70～75℃的目的是 進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心，操作過程中用到的有關(guān)酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，轉(zhuǎn)基因植物的基因組中含有目的基因片段，原因是 農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上。
（4）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)欠癖磉_(dá)出了LEA，常用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】cDNA；PCR；使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成；限制酶和DNA連接酶；農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：3難度：0.5
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1．紅細(xì)胞生成素（EPO）是人體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然 EPO來源極為有限，某科研團(tuán)隊(duì)采用基因工程培育轉(zhuǎn)基因羊作為乳腺生物反應(yīng)器，使其能合成EPO。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
2．煙草是我國(guó)一些地區(qū)的經(jīng)濟(jì)作物之一，提高煙草質(zhì)量有利于提高經(jīng)濟(jì)收入。我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)研究了一種轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種，抗鹽基因的結(jié)構(gòu)和獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程（①～⑤）如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：
（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項(xiàng)）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對(duì)目的基因進(jìn)行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號(hào)）。過程②③采用的方法是。
（4）⑤過程需要用到等植物激素，在誘導(dǎo)愈傷組織分化成幼苗的過程中，這兩種植物激素的比例會(huì)發(fā)生變化，原因是。發(fā)布：2024/12/20 2:30:1組卷：16引用：5難度：0.5 -
3．如表為5種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)，如圖為某種質(zhì)粒和目的基因，箭頭所指為限制酶酶切位點(diǎn)?，F(xiàn)要將圖中的目的基因定向插入到質(zhì)粒中，以制備轉(zhuǎn)基因植株。下列說法正確的是（ ）
限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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