除草劑的有效成分草甘膦能夠?qū)Ｒ坏匾种艵PSP合酶的活性，從而使植物體內(nèi)多種代謝途徑受到影響而導(dǎo)致植物死亡。草甘膦沒(méi)有選擇性，它在除掉雜草的同時(shí)也會(huì)使作物受損。解決這個(gè)問(wèn)題的方法之一就是導(dǎo)入外源EPSP合酶基因培育抗草甘膦的作物。如圖1為轉(zhuǎn)基因抗草甘膦矮牽牛的培育過(guò)程，請(qǐng)回答。

（1）為大量獲得抗草甘膦基因，可選擇圖2中引物

Ⅱ和引物Ⅲ

Ⅱ和引物Ⅲ

（用圖中羅馬數(shù)字表示）組合進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
（2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，EPSP合酶基因應(yīng)插入到農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒

T-DNA

T-DNA

上，原因是

T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上

。
（3）⑤過(guò)程中甲細(xì)胞分泌的

酚類化合物

酚類化合物

，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞，從而把EPSP合酶基因?qū)氲郊准?xì)胞中。⑥過(guò)程為

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

。
（4）為了鑒定轉(zhuǎn)基因矮牽牛植株是否具有抗草甘膦功能，還需要

用草甘膦噴灑轉(zhuǎn)基因矮牽牛

用草甘膦噴灑轉(zhuǎn)基因矮牽牛

，觀察其存活情況。
（5）如果增加轉(zhuǎn)入外源EPSP合酶基因的數(shù)量，理論上轉(zhuǎn)基因矮牽牛對(duì)草甘膦的抗性

會(huì)（或不會(huì)）

會(huì)（或不會(huì)）

（填“會(huì)”或“不會(huì)”）增加，理由是

外源EPSP合酶基因數(shù)量增加，矮牽牛體內(nèi)EPSP合酶的表達(dá)水平升高，對(duì)草甘膦的抗性增強(qiáng)（或增加的外源EPSP合酶基因在矮牽牛細(xì)胞內(nèi)無(wú)法表達(dá)；或增加的外源EPSP合酶基因使EPSP合酶的總體表達(dá)量下降）

外源EPSP合酶基因數(shù)量增加，矮牽牛體內(nèi)EPSP合酶的表達(dá)水平升高，對(duì)草甘膦的抗性增強(qiáng)（或增加的外源EPSP合酶基因在矮牽牛細(xì)胞內(nèi)無(wú)法表達(dá)；或增加的外源EPSP合酶基因使EPSP合酶的總體表達(dá)量下降）

。