新冠病毒肆虐全球，給人們的日常生產(chǎn)、生活帶來(lái)很大的影響，因此研發(fā)新冠病毒疫苗受到廣泛關(guān)注。疫苗研制時(shí)常需要構(gòu)建重組病毒載體，部分過(guò)程如圖所示，其中A～C表示結(jié)構(gòu)或物質(zhì)，NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ四種酶的識(shí)別序列和酶切位點(diǎn)詳見(jiàn)下表。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
識(shí)別序列和切割位點(diǎn)	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓CTAGC	G↓GATCC

（1）分析圖中C的黏性末端可確定，需要用

NcoI和BamHI

NcoI和BamHI

（填限制酶名稱）切割質(zhì)粒B。
（2）重組質(zhì)粒1用

NcoI

NcoI

（填限制酶名稱）處理獲得線性化片段，在緩沖液中將其與某克隆片段混合，適宜條件下成功連接。由圖可知線性分子可以與克隆片段連接成環(huán)的原因可能是

具有相同的黏性末端

具有相同的黏性末端

。連接后可得到的環(huán)狀DNA分子最多有

3

3

種（上述片段均足量且不考慮3個(gè)及以上DNA片段的連接）。
（3）獲得的重組病毒載體可以導(dǎo)入工程菌，高效表達(dá)出

S蛋白

S蛋白

用于制備疫苗。與減毒活疫苗比較，該類疫苗安全性更高，其原因是

此疫苗不含新冠病毒的核酸，不會(huì)在人體內(nèi)繁殖

此疫苗不含新冠病毒的核酸，不會(huì)在人體內(nèi)繁殖

。
（4）新型冠狀病毒感染人體后，其S蛋白識(shí)別人體細(xì)胞膜蛋白ACE2并與之結(jié)合，使病毒侵入細(xì)胞，同時(shí)會(huì)引起人體相應(yīng)的免疫反應(yīng)。重組人源蛋白ACE2可用于治療新冠病毒肺炎，請(qǐng)推測(cè)該藥物的作用機(jī)理：

重組人源/可溶性/藥物中的 ACE2 蛋白（與細(xì)胞膜蛋白 ACE2）競(jìng)爭(zhēng)性的與 S 蛋白結(jié)合，降低新冠病毒對(duì)細(xì)胞的黏附和感染

重組人源/可溶性/藥物中的 ACE2 蛋白（與細(xì)胞膜蛋白 ACE2）競(jìng)爭(zhēng)性的與 S 蛋白結(jié)合，降低新冠病毒對(duì)細(xì)胞的黏附和感染

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