2007年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎授予在“基因靶向”技術(shù)方面作出突出貢獻的三位科學(xué)家?！盎虬邢颉奔夹g(shù)指的是應(yīng)用DNA同源重組原理，通過一定的載體，用設(shè)計好的目的基因替代靶基因，從而達到使靶基因功能喪失的目的。借助這一技術(shù)，科學(xué)家可以用小鼠進行實驗，使其體內(nèi)的某項特定基因喪失功能，以幫助人們找到治療疾病的有效方法。下面是該實驗的基本過程，請回答有關(guān)問題。
（1）獲取目的基因。
①目的基因是靶基因的同源片段。經(jīng)過修飾使靶基因的功能改變或喪失，就可獲得目的基因。如果要獲得活性降低了的X酶蛋白的目的基因，可以采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，請簡述其過程。X酶蛋白的功能分析→X酶蛋白的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測和設(shè)計→X酶多肽的氨基酸序列設(shè)計→X酶基因的改造X酶蛋白的功能分析→X酶蛋白的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測和設(shè)計→X酶多肽的氨基酸序列設(shè)計→X酶基因的改造。
②為了提高實驗成功率，需要通過PCR技術(shù)獲得目的基因的大量拷貝。與體內(nèi)DNA復(fù)制相比，PCR反應(yīng)體系需加入哪兩種特別的物質(zhì)？兩種引物、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）兩種引物、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）。
（2）構(gòu)建基因表達載體。質(zhì)粒是具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA，它所具有的一至多個限制酶切割限制酶切割位點，使目的基因插入其中成為可能，因此常被選作載體。
（3）將基因表達載體導(dǎo)入胚胎干細胞，從中篩選出成功發(fā)生了同源重組的胚胎干細胞，然后培育出小鼠。
（4）通過檢測目的基因是否表達出蛋白質(zhì)產(chǎn)品，可以確定該小鼠體內(nèi)是否成功發(fā)生了基因的同源重組。請簡述這種檢測方法。提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原-抗體雜交提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原-抗體雜交。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】X酶蛋白的功能分析→X酶蛋白的三維結(jié)構(gòu)預(yù)測和設(shè)計→X酶多肽的氨基酸序列設(shè)計→X酶基因的改造；兩種引物、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）；限制酶切割；提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進行抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：15引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6