如圖1是基因工程操作時(shí)用到的質(zhì)粒，其中不同數(shù)字代表不同的限制酶切點(diǎn)，回答下列問題：
（1）基因工程的核心操作是 構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體。在此核心操作過程中應(yīng)選用 1和31和3（填圖中數(shù)字）兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，選用兩種酶而不選擇一種酶進(jìn)行切割的目的是 避免目的基因自身環(huán)化和反向連接避免目的基因自身環(huán)化和反向連接。除圖示外，該質(zhì)粒若作為載體還必須具有的結(jié)構(gòu)是 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)。
（2）若目的基因兩側(cè)沒有上述限制酶切點(diǎn)，可用圖所示的 11方法在目的基因兩側(cè)添加限制酶識(shí)別序列，推測(cè)在PCR的第 22次循環(huán)后可得到添加了一側(cè)限制酶識(shí)別序列的目的基因片段，在PCR的第次循環(huán)后可得到添加了兩側(cè)限制酶識(shí)別序列的目的基因片段。
（3）請(qǐng)寫出限制酶專一性的兩點(diǎn)體現(xiàn) 只能識(shí)別特定的核苷酸序列，在特定的切點(diǎn)切割DNA分子只能識(shí)別特定的核苷酸序列，在特定的切點(diǎn)切割DNA分子。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】構(gòu)建基因表達(dá)載體；1和3；避免目的基因自身環(huán)化和反向連接；復(fù)制原點(diǎn)；1；2；只能識(shí)別特定的核苷酸序列，在特定的切點(diǎn)切割DNA分子
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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