人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術獲取HSA的兩條途徑,其中報告基因表達的產物能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色。圖二為HSA基因兩側的核苷酸序列。圖三為相關限制酶的識別序列和切割位點。據圖回答下列問題:
(1)基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建基因表達載體的構建,完成過程②所需要技術手段是植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。
(2)采用PCR技術擴增HSA基因,根據其兩端序列,則需要選擇的一對引物序列是A CA C。
A.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
B.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-CATTCAATTCTC-3′
C.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
D.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GAGAATTGAATG-3′
(3)依據圖一、圖二和圖三分析,下列敘述錯誤的是CC。
A.應該使用酶B和酶C獲取HSA基因
B.應該使用酶A和酶B切割Ti質粒
C.成功建構的重組質粒含1個酶A的識別位點
D.成功建構的重組質粒用酶C處理將得到2個DNA片段
(4)圖一過程①中需將植物細胞與農桿菌農桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓T-DNAT-DNA整合到植物細胞染色體DNA上;除盡農桿菌后,還須轉接到含物質K物質K的培養(yǎng)基上篩選出轉化的植物細胞。
(5)過程④前對卵細胞供體母牛進行超數排卵超數排卵處理。過程通常將受精卵培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚階段。過程⑤鑒定胚胎性別時常取滋養(yǎng)層滋養(yǎng)層細胞做DNA分析。
(6)為檢測HSA基因的表達情況,可提取受體細胞的蛋白質蛋白質,用抗血清白蛋白的抗體進行雜交實驗。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】基因表達載體的構建;植物組織培養(yǎng);A C;C;農桿菌;T-DNA;物質K;超數排卵;桑葚胚或囊胚;滋養(yǎng)層;蛋白質
【解答】
【點評】
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