人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，但是心?；颊咦⑸浯髣┝康膖-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實，將t-PA蛋白第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對天然的t-PA基因進行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。（注：如圖表示相關的目的基因載體及限制酶，PCLY11為質粒，新霉素為抗生素）。請回答下列問題：
（1）以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為 蛋白質蛋白質工程。已知t-PA基因序列已測出，且第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的模板鏈堿基序列為AGA，因此要獲得改造后的目的基因最好采用 化學合成化學合成法獲得。若t-PA基因可從cDNA文庫中獲取，cDNA文庫中的基因 不含不含（填“含有”或“不含”）內(nèi)含子序列。
（2）若用PCR技術擴增改良后的t-PA基因，需要在PCR擴增儀中加入 22種引物，其作用是 使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。在t-PA改良基因與質粒pCLY11構建基因表達載體時，需要用限制酶 BglⅡ和XmaⅠBglⅡ和XmaⅠ切割。
（3）以大腸桿菌作為受體細胞，在含新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細胞并非都是目的菌株，原因是 導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長，這時需選擇呈 白白色的菌落，進一步培養(yǎng)檢測和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】蛋白質；化學合成；不含；2；使DNA聚合酶從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；BglⅡ和XmaⅠ；導入未連目的基因的質粒的大腸桿菌也能在這種培養(yǎng)基上生長；白
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：36引用：1難度：0.7
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
把好題分享給你的好友吧~~