犬細(xì)小病毒(CPV)主要感染幼犬,傳染性極強(qiáng),死亡率也高。利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程如圖所示。回答下列問(wèn)題:
(1)制備單克隆抗體依賴的生物技術(shù)有 動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(答出2點(diǎn))。步驟①中,用滅活的CPV免疫小鼠需要在一定時(shí)間內(nèi)間隔注射3次,其目的是 刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞。
(2)經(jīng)過(guò)步驟②后獲得的是多種類(lèi)型的雜交細(xì)胞,原因是 細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且不能百分之百成功融合細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且不能百分之百成功融合。對(duì)雜交細(xì)胞等用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到雜交瘤細(xì)胞,對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)過(guò)多次篩選才能獲得足夠數(shù)量的能分泌抗CPV抗體的細(xì)胞。
(3)體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞后從培養(yǎng)液中提取到抗CPV單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中有各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還需要添加 血漿血漿以補(bǔ)充細(xì)胞生長(zhǎng)所需的未知營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和防止雜菌污染。
(4)對(duì)疑似感染CPV的幼犬進(jìn)行確診時(shí),可用獲得的抗CPV單克隆抗體進(jìn)行 抗原抗原檢測(cè)。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】動(dòng)物細(xì)胞融合、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng);刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的B淋巴細(xì)胞;細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且不能百分之百成功融合;克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè);血漿;抗原
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:56引用:7難度:0.6
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?br />
A.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中除營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還要添加一定量的血清、血漿 B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,并將其置于含有95%O2加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng) C.圖中篩選1的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞 D.若B淋巴細(xì)胞的基因型為HH,骨髓瘤細(xì)胞的基因型為SS,在兩兩融合后,基因型可能有HHSS、HHHH、SSSS 發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6 -
3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過(guò)PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202304/369/62ee43c5.png" style="vertical-align:middle" />
A.向小鼠注入抗原后提取B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交瘤細(xì)胞 B.可通過(guò)將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠細(xì)胞制備嵌合抗體F′ C.據(jù)圖推測(cè),抗體基因序列被替換后改變了與抗原的結(jié)合位點(diǎn) D.在共同作用實(shí)驗(yàn)中,當(dāng)F′濃度較高時(shí),抗原更多與F′結(jié)合 發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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