[生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題]
油菜素內(nèi)酯被認為是第六類植物激素,廣泛分布于植物體內(nèi),能促進細胞生長、細胞分裂和農(nóng)藥在植物體內(nèi)的降解和代謝。油菜素內(nèi)酯可以提高農(nóng)藥降解的基因(如P450基因和紅霉素抗性基因)的表達和酶活性,其合成的蛋白酶能把農(nóng)藥逐漸轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)或低毒甚至無毒物質(zhì),有的則被直接排出體外。具體過程如圖所示:
(1)在構(gòu)建重組質(zhì)粒1時,用兩種限制酶進行切割,可以有效防止 酶切產(chǎn)物自身環(huán)化(反向連接)酶切產(chǎn)物自身環(huán)化(反向連接),選擇的原則是:①質(zhì)粒內(nèi),每一種限制酶有 一個酶切位點一個酶切位點;②酶切后,油菜素內(nèi)酯合成酶基因形成的兩個黏性末端序列 不相同不相同。
(2)因為農(nóng)桿菌的質(zhì)粒中存在 T-DNAT-DNA,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因插入到植物細胞的 染色體的DNA染色體的DNA上,使特定的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
(3)重組質(zhì)粒是否有效導入受體細胞需要進行檢測和篩選,可用 紅霉素抗性基因紅霉素抗性基因制成探針,以檢測重組質(zhì)粒2是否導入。在培養(yǎng)基中加入 紅霉素紅霉素可將含有目的基因的細胞篩選出來。進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細胞,該細胞通過 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù),可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】酶切產(chǎn)物自身環(huán)化(反向連接);一個酶切位點;不相同;T-DNA;染色體的DNA;紅霉素抗性基因;紅霉素;植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:12引用:2難度:0.6
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