高粱是我國重要的糧食作物，但其賴氨酸含量較低。天冬氨酸激酶（AK）和二氫吡啶羧酸合酶（DHPS）是賴氨酸合成途徑中兩種重要的酶，并協(xié)同控制植物中游離賴氨酸的合成速率?？茖W(xué)家把來源于細(xì)菌的外源AK和DHPS基因與胚乳特異性啟動子導(dǎo)入高粱，獲得游離賴氨酸含量顯著增加的高粱植株。請回答相關(guān)問題。
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中，選用兩種限制酶同時處理目的基因和質(zhì)粒，其優(yōu)點是 目的基因和質(zhì)粒的正向連接，避免發(fā)生質(zhì)粒和目的基因的自連和反向連接目的基因和質(zhì)粒的正向連接，避免發(fā)生質(zhì)粒和目的基因的自連和反向連接，構(gòu)建基因表達(dá)載體還需要的工具酶是 DNA連接酶DNA連接酶。AK基因和DHPS基因上游的胚乳特異性啟動子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別結(jié)合的位點，驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄。
（2）將目的基因?qū)敫吡患?xì)胞最常用的方法是 花粉管通道法花粉管通道法，目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后需要 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)利用技術(shù)才能獲得轉(zhuǎn)基因植株。
（3）目的基因的檢測與鑒定，用PCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因植株中目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄出mRNA，首先從轉(zhuǎn)基因高粱植株的 胚乳細(xì)胞胚乳細(xì)胞中提取mRNA，然后通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，圖1是對擴(kuò)增產(chǎn)物電泳的結(jié)果，植株 4、5、74、5、7（填數(shù)字）中AK基因和DHPS基因都轉(zhuǎn)錄成功。
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（4）圖2為野生高粱細(xì)胞內(nèi)賴氨酸合成與分解代謝的部分過程。細(xì)菌基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，據(jù)此分析轉(zhuǎn)基因植株賴氨酸含量較高的原因 基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制。LKR和SDH是賴氨酸分解代謝的關(guān)鍵酶，據(jù)此再提出一點利用基因工程思路提高高粱賴氨酸含量的方法是 設(shè)法改造或敲除控制LKR合成的相關(guān)基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進(jìn)而提高賴氨酸的含量設(shè)法改造或敲除控制LKR合成的相關(guān)基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進(jìn)而提高賴氨酸的含量。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】目的基因和質(zhì)粒的正向連接，避免發(fā)生質(zhì)粒和目的基因的自連和反向連接；DNA連接酶；RNA聚合酶；花粉管通道法；植物組織培養(yǎng)；胚乳細(xì)胞；逆轉(zhuǎn)錄；4、5、7；基因編碼的AK和DPHS對賴氨酸濃度不敏感，因而賴氨酸合成過程不會因為賴氨酸含量上升而被抑制；設(shè)法改造或敲除控制LKR合成的相關(guān)基因，從而減少賴氨酸的分解過程，進(jìn)而提高賴氨酸的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/27 8:0:9組卷：5引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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