2021年11月24日,南非首次向WHO報(bào)告了新冠奧密克戎變異株的感染病例,此后迅速傳播至全球多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。與其他新冠病毒相比,奧密克戎具有高度的傳染性,是因?yàn)榇掏坏鞍祝⊿蛋白)變異多達(dá)43處,但因奧密克戎在肺部等組織中不易繁殖,所以致病性較弱。S蛋白是新冠病毒(+RNA病毒)識(shí)別宿主細(xì)胞受體的一種關(guān)鍵蛋白,是誘發(fā)機(jī)體免疫反應(yīng)的主要抗原。請(qǐng)回答:
(1)奧密克戎比其他新冠病毒傳播性強(qiáng)是因?yàn)閵W密克戎的刺突蛋白(S蛋白)變異多,導(dǎo)致 有更多宿主細(xì)胞可選擇有更多宿主細(xì)胞可選擇、免疫逃逸能力強(qiáng)免疫逃逸能力強(qiáng)。
(2)以RNA為模板,通過(guò)RT-PCR(反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)可獲取S蛋白基因。進(jìn)行RT-PCR時(shí)一般需要加入4種脫氧核苷三磷酸(dNTP)而不是脫氧核苷酸,其原因是在子鏈延伸過(guò)程中dNTP提供 能量和原料能量和原料,同時(shí)需加入的酶有 逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶。
(3)據(jù)圖1分析,要獲取大量S蛋白基因應(yīng)選擇的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ,其作用是使酶能夠從引物的 3’3’端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。通過(guò)電泳鑒定PCR的產(chǎn)物,結(jié)果如圖2所示。1號(hào)泳道為標(biāo)準(zhǔn)(Marker,不同已知長(zhǎng)度的DNA片段混合物),2號(hào)泳道為陽(yáng)性對(duì)照(提純的S蛋白基因片段),3號(hào)泳道為實(shí)驗(yàn)組。若3號(hào)泳道出現(xiàn)雜帶可能的原因有 模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低。
(4)接種新冠疫苗加強(qiáng)針是應(yīng)對(duì)奧密克戎的有效手段之一,腺病毒是一種DNA病毒,毒性很弱,感染后一般不會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀。如圖3是生產(chǎn)重組腺病毒疫苗的流程。請(qǐng)回答:
①若PacⅠ酶在過(guò)程②中使用,該酶所作用的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。線性pAd需要轉(zhuǎn)入特定細(xì)胞才能產(chǎn)生重組腺病毒,原因是基因的表達(dá)需要細(xì)胞提供 場(chǎng)所、原料和酶等條件場(chǎng)所、原料和酶等條件(至少答2點(diǎn))。
②將重組腺病毒接種到人體中的方式是 肌肉注射肌肉注射。據(jù)圖3分析,重組腺病毒對(duì)人體相對(duì)安全,理由是 重組腺病毒缺失復(fù)制原點(diǎn)(重組腺病毒不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制)重組腺病毒缺失復(fù)制原點(diǎn)(重組腺病毒不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】有更多宿主細(xì)胞可選擇;免疫逃逸能力強(qiáng);能量和原料;逆轉(zhuǎn)錄酶和Taq酶;Ⅱ、Ⅲ;3’;模板受到污染;引物的特異性不強(qiáng);退火溫度偏低;磷酸二酯鍵;場(chǎng)所、原料和酶等條件;肌肉注射;重組腺病毒缺失復(fù)制原點(diǎn)(重組腺病毒不會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/7/26 8:0:9組卷:16引用:2難度:0.4
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
A.應(yīng)根據(jù)目的基因的一段已知序列設(shè)計(jì)兩種引物 B.PCR每一循環(huán)包括變性、復(fù)性和延伸三個(gè)過(guò)程 C.PCR結(jié)束后有靶分子的反應(yīng)單位能檢測(cè)出熒光 D.每個(gè)反應(yīng)單位中都需要加入解旋酶和耐高溫DNA聚合酶 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物,得到兩個(gè)常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物,突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列。回答下列問(wèn)題:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過(guò)
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
A.在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構(gòu)象等有關(guān) B.凝膠中DNA分子通過(guò)染色,可以在波長(zhǎng)300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái) C.該實(shí)驗(yàn)用到的緩沖液和酶,使用前為加快融化速度,從冰箱取出直接水浴加熱 D.電泳技術(shù)可以用于人類(lèi)親子鑒定、生物間親緣關(guān)系的鑒定 發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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