人參中含有多種固醇類化合物，統(tǒng)稱為人參皂苷。其中人參皂苷Rg3能有效抗腫瘤血管生成。通過特定的細(xì)胞培養(yǎng)可以大量生產(chǎn)人參皂苷Rg3。具體的培養(yǎng)流程如下：首先利用人參組織制備出人參單細(xì)胞懸液，再通過植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物，最后通過分離純化獲得特定產(chǎn)物Rg3。請回答：
（1）制備單細(xì)胞懸液。細(xì)胞分離有三種方法；其一是直接從外植體分離，包括機(jī)械法或酶解法，后者常用

果膠酶

果膠酶

酶處理；其二是愈傷組織誘導(dǎo)法，愈傷組織相對松散，可直接放入

液體培養(yǎng)基

液體培養(yǎng)基

在搖床上進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，獲得單細(xì)胞懸浮液；其三是原生質(zhì)體再生法，在0.5～0.6mol/L的甘露醇溶液（作用是

維持較高滲透壓，保持原生質(zhì)體穩(wěn)定

維持較高滲透壓，保持原生質(zhì)體穩(wěn)定

）中，用纖維素酶和果膠酶處理根尖、葉片、愈傷組織等細(xì)胞，獲得球形的原生質(zhì)體，然后在適宜條件下誘導(dǎo)再生出

細(xì)胞壁

細(xì)胞壁

，獲得單個植物細(xì)胞。
（2）特定細(xì)胞系的培養(yǎng)。上述細(xì)胞經(jīng)過初步培養(yǎng)，選出

能穩(wěn)定合成人參皂甙

能穩(wěn)定合成人參皂甙

的細(xì)胞，在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過多次

繼代

繼代

培養(yǎng)，獲得大量能合成人參皂甙的細(xì)胞系，用于工業(yè)化生產(chǎn)。在該培養(yǎng)過程中，能影響人參皂甙產(chǎn)量的因素除培養(yǎng)基因素外，還有哪些因素？

細(xì)胞本身特性（基因型），培養(yǎng)時間（或繼代培養(yǎng)次數(shù)）溫度等

細(xì)胞本身特性（基因型），培養(yǎng)時間（或繼代培養(yǎng)次數(shù)）溫度等

（列舉兩項）
（3）Rg3產(chǎn)物分離純化。用乙醇溶解提取出總皂甙，然后加入硅膠柱，乙醇揮發(fā)后，皂甙吸附在膠柱上，然后從膠柱上端加注乙醇進(jìn)行層析，先后分離出不同類型的皂甙。硅膠層析的方法能從總皂甙中分離出Rg3依據(jù)的原理是

不同皂甙對硅膠柱吸附能力不同，隨乙醇被分離出來的先后不同

不同皂甙對硅膠柱吸附能力不同，隨乙醇被分離出來的先后不同

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