傳統(tǒng)影像學診斷在發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移瘤形成時往往已延誤最佳治療時機。目前可通過液體活檢來檢查血液中的循環(huán)腫瘤細胞(CTCs),用以診斷是否存在癌癥轉(zhuǎn)移,步驟如下:注:上皮組織細胞來源的CTCs與正常白細胞表面蛋白質(zhì)的一些差異(如表)
表 細胞表面抗原標志物表達差異
蛋白種類 細胞類型 |
CD45 | EpCAM |
白細胞 | 有 | 無 |
CTCs | 無 | 有 |
(1)制備單克隆抗體:首先用CD45蛋白對小鼠進行免疫,然后經(jīng)過如圖的①、②、③、④等步驟,獲得大量單克隆抗體A;再用EpCAM免疫小鼠,經(jīng)過相同步驟獲得單克隆抗體B。
步驟①涉及到的細胞工程技術(shù)主要有
動物細胞融合
動物細胞融合
和 動物細胞培養(yǎng)
動物細胞培養(yǎng)
。步驟②通常使用選擇培養(yǎng)基,主要目的是篩選出
雜交瘤細胞
雜交瘤細胞
。步驟③主要需要經(jīng)過和抗體檢測,并經(jīng)多次篩選,最終獲得
產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞
產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞
。步驟④是大規(guī)模培養(yǎng),主要方法有:
體內(nèi)培養(yǎng)
體內(nèi)培養(yǎng)
和 體外培養(yǎng)
體外培養(yǎng)
。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交瘤細胞會因為 細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等
細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等
(至少答出兩點)而分裂受阻,需進行傳代培養(yǎng)。(2)利用免疫磁珠進行分離:取待測人員少量血液于采集管內(nèi),將連接有單克隆抗體
A
A
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域并取出,這樣可以排除非腫瘤細胞的干擾;再將連接有單克隆抗體 B
B
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域取出,收集CTCs。(3)計數(shù)并診斷:若出現(xiàn)
CTCs陽性
CTCs陽性
(細胞)數(shù)量超出正常范圍,即可診斷發(fā)生癌細胞轉(zhuǎn)移。【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】動物細胞融合;動物細胞培養(yǎng);雜交瘤細胞;產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞;體內(nèi)培養(yǎng);體外培養(yǎng);細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等;A;B;CTCs陽性
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:1難度:0.6
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1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6~5倍,導致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱。科學家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實現(xiàn)了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( )
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(shù)(免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:
(1)與植物體細胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導融合的方法是
(2)對③篩選出的雜交瘤細胞,還需進行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
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