EPO是促紅細胞生成素的英文簡稱,是一種激素樣蛋白質物質,可促進體內新紅細胞生成。人類已可通過基因工程合成EPO基因,并采用中國倉鼠卵巢(CHO)細胞表達系統(tǒng)來獲取產物,其過程如圖。請回答下列問題:
(1)從人體組織中提取EPO的mRNA,在 逆轉錄逆轉錄的作用下可合成EPO基因的cDNA,再通過PCR技術獲得大量EPO基因,PCR擴增時需將溫度調至55~60℃進行復性,其目的是 使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。
(2)為了得到更多的卵母細胞,可在步驟②對供體母鼠進行 超數(shù)排卵(注射促性腺激素)超數(shù)排卵(注射促性腺激素)處理,卵母細胞培養(yǎng)到 減數(shù)第二次分裂中減數(shù)第二次分裂中期與獲能的精子相遇,精子穿越透明帶,完成體外受精。
(3)為了確保能用倉鼠卵巢(CHO)細胞表達系統(tǒng)來獲取產物,步驟①中需要將 EPO基因與倉鼠卵巢細胞中特異性表達的基因的啟動子重組在一起EPO基因與倉鼠卵巢細胞中特異性表達的基因的啟動子重組在一起,并且基因表達載體中所含的 啟動子啟動子能驅動EPO基因的轉錄。
(4)若想檢驗轉基因倉鼠是否成功表達EPO,可以采用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術對血液來進行檢測。
【答案】逆轉錄;使兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合;超數(shù)排卵(注射促性腺激素);減數(shù)第二次分裂中;EPO基因與倉鼠卵巢細胞中特異性表達的基因的啟動子重組在一起;啟動子;抗原—抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/17 6:0:3組卷:0引用:1難度:0.6
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