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大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列,位于該質(zhì)粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果沒(méi)有插入外源基因,lacZ基因便可表達(dá)出β-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時(shí),X-gal便會(huì)被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,帶有pUC118質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)β-半乳糖苷酶,培養(yǎng)基中的X-gal不會(huì)被水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成白色菌落.pUC118還攜帶了氨芐青霉素抗性基因.左圖是利用lacZ基因的插入失活篩選重組質(zhì)粒示意圖.據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
(1)人體DNA的目的基因中
不能
不能
(能或不能)含有大腸桿菌pUC118質(zhì)粒的某限制酶唯一酶切序列.
(2)作為受體大腸桿菌應(yīng)
不含氨芐青霉素抗性基因(或?qū)Π逼S青霉素敏感)
不含氨芐青霉素抗性基因(或?qū)Π逼S青霉素敏感)
,以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌.為了增加導(dǎo)入成功率,取用
Ca2+
Ca2+
溶液處理(可增加細(xì)菌
細(xì)胞壁
細(xì)胞壁
的通透性)過(guò)的受體大腸桿菌,置于試管Ⅱ中,并加入
在試管Ⅰ中制備好的DNA
在試管Ⅰ中制備好的DNA

(3)圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入
IPTG、X-gal、氨芐青霉素
IPTG、X-gal、氨芐青霉素
等物質(zhì),用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌.
(4)將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),以檢測(cè)受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,請(qǐng)預(yù)測(cè)菌落的顏色,并分析結(jié)果:
如果長(zhǎng)出藍(lán)色菌落,說(shuō)明自連的運(yùn)載體pUC118質(zhì)粒已轉(zhuǎn)入受體菌,但目的基因沒(méi)有接入運(yùn)載體(或說(shuō)明重組質(zhì)粒沒(méi)導(dǎo)入受體大腸桿菌)
如果長(zhǎng)出藍(lán)色菌落,說(shuō)明自連的運(yùn)載體pUC118質(zhì)粒已轉(zhuǎn)入受體菌,但目的基因沒(méi)有接入運(yùn)載體(或說(shuō)明重組質(zhì)粒沒(méi)導(dǎo)入受體大腸桿菌)

如果長(zhǎng)出白色菌落,說(shuō)明重組質(zhì)粒已導(dǎo)入受體大腸桿菌
如果長(zhǎng)出白色菌落,說(shuō)明重組質(zhì)粒已導(dǎo)入受體大腸桿菌

【答案】不能;不含氨芐青霉素抗性基因(或?qū)Π逼S青霉素敏感);Ca2+;細(xì)胞壁;在試管Ⅰ中制備好的DNA;IPTG、X-gal、氨芐青霉素;如果長(zhǎng)出藍(lán)色菌落,說(shuō)明自連的運(yùn)載體pUC118質(zhì)粒已轉(zhuǎn)入受體菌,但目的基因沒(méi)有接入運(yùn)載體(或說(shuō)明重組質(zhì)粒沒(méi)導(dǎo)入受體大腸桿菌);如果長(zhǎng)出白色菌落,說(shuō)明重組質(zhì)粒已導(dǎo)入受體大腸桿菌
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:9引用:1難度:0.5
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉?wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     

    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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