枯草芽孢桿菌可分泌纖維素酶。研究者篩選到一株降解纖維素能力較強(qiáng)的枯草芽孢桿菌菌株（B菌），從中克隆得到了一種纖維素酶（C1酶）基因。將獲得的C1酶基因與高效表達(dá)載體（HT質(zhì)粒）連接，再導(dǎo)入B菌，以期獲得降解纖維素能力更強(qiáng)的工程菌。
（1）對克隆到的C1酶基因測序，與數(shù)據(jù)庫中的C1酶基因編碼序列相比有兩個堿基對不同，但兩者編碼出的蛋白的氨基酸序列相同，這是因?yàn)?密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變?nèi)匀痪幋a同一種氨基酸密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變?nèi)匀痪幋a同一種氨基酸。
（2）C1酶基因以B鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，轉(zhuǎn)錄時mRNA自身的延伸方向?yàn)?′→3′。為了使C1酶基因按照正確的方向與已被酶切的HT質(zhì)粒連接，克隆C1酶基因時在其兩端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位點(diǎn)。該基因內(nèi)部沒有這兩種酶切位點(diǎn)。圖1中酶切位點(diǎn)1和2所對應(yīng)的酶分別是 BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調(diào)換）BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調(diào)換）。酶切后的C1酶基因需要在 DNA連接酶DNA連接酶酶的作用下與HT質(zhì)粒連接構(gòu)建基因表達(dá)載體。一個基因表達(dá)載體的組成必須有啟動子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)、目的基因目的基因、標(biāo)記基因（抗性基因）標(biāo)記基因（抗性基因）等。
（3）轉(zhuǎn)化形成工程菌的過程中，應(yīng)先用 CaCl2CaCl2處理枯草芽孢桿菌，使其處于容易吸收周圍DNA的狀態(tài)。
（4）將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為三組，一組接種工程菌，對照組1不進(jìn)行處理，對照組2進(jìn)行相應(yīng)處理。在相同條件下培養(yǎng)96小時，檢測培養(yǎng)基中纖維素的含量。圖2結(jié)果說明工程菌降解纖維素的能力最強(qiáng)，推測對照組2的處理應(yīng)為 接種（等量）B菌接種（等量）B菌。
（5）預(yù)期該工程菌在處理廢棄物以保護(hù)環(huán)境方面可能的應(yīng)用 降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物。（舉一例）
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】密碼子具有簡并性，發(fā)生堿基的改變?nèi)匀痪幋a同一種氨基酸；BamHⅠ、SmaⅠ（順序不能調(diào)換）；DNA連接酶；目的基因；標(biāo)記基因（抗性基因）；CaCl2；接種（等量）B菌；降解秸稈，減少秸稈燃燒帶來的空氣污染；處理綠色廢棄物
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：7引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
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（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6