某動(dòng)物體內(nèi)含有某目的基因，研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存，該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因（AmpR）、LacZ基因及一些酶切位點(diǎn)，其結(jié)構(gòu)和簡(jiǎn)單的操作步驟如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）保存基因技術(shù)的成熟使構(gòu)建某種生物的基因文庫(kù)成為可能，重組DNA技術(shù)是保存生物基因的關(guān)鍵技術(shù)。據(jù)圖總結(jié)在受體菌中保存基因的基本步驟：

目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定→保存含目的基因的細(xì)胞（或細(xì)菌）

目的基因的篩選與獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定→保存含目的基因的細(xì)胞（或細(xì)菌）

（用→將各步驟連接）。
（2）在第③步中，為了使質(zhì)粒DNA能與目的基因連接，需要在混合物中加入

DNA連接

DNA連接

酶。若第②步用同一種限制酶處理質(zhì)粒和目的基因，僅考慮1個(gè)目的基因和1個(gè)質(zhì)粒，則在第③步的混合物中，會(huì)形成

2

2

種含目的基因的重組產(chǎn)物。進(jìn)行第④步之前一般用Ca₂+對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理，目的是

使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)

使大腸桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)

。
（3）在僅添加了氨芐青霉素的培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞不一定是目的細(xì)胞，請(qǐng)說(shuō)明理由：

導(dǎo)入不含目的基因的質(zhì)粒的細(xì)胞也能在含有氨芐青霉素成分的培養(yǎng)基上存活

導(dǎo)入不含目的基因的質(zhì)粒的細(xì)胞也能在含有氨芐青霉素成分的培養(yǎng)基上存活

。請(qǐng)對(duì)篩選目的細(xì)胞的操作提出完善意見(jiàn)：

在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素成分的同時(shí)加入X-gal物質(zhì)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，菌落顏色為白色的即為目的菌落

在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素成分的同時(shí)加入X-gal物質(zhì)，培養(yǎng)一段時(shí)間后，菌落顏色為白色的即為目的菌落

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