限制酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的識別序列及其切割位點(diǎn)如表所示。某質(zhì)粒、目的基因兩端相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示?；卮鹣铝袉栴}：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 識別序列及切割位點(diǎn) |
|
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|
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（1）只與一個五碳糖連接的磷酸基團(tuán)稱為游離的磷酸基團(tuán)，一個質(zhì)粒分子含有
0
0
個游離的磷酸基團(tuán)。圖示質(zhì)粒經(jīng)限制酶Ⅰ完全酶切后產(chǎn)生的DNA片段共含有 4
4
個游離的磷酸基團(tuán)。（2）限制酶Ⅱ能斷開的是圖3中
a
a
（填字母）處的鍵。若經(jīng)限制酶Ⅰ切割的DNA末端與經(jīng)限制酶Ⅱ切割的DNA末端連接，則連接部位的6個堿基對序列為 
都不能
都不能
（填“都能”、“都不能”或“中只有一種能”）將其切開。（3）若用圖中的質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，則應(yīng)選用限制酶
Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
共同切割，不選用另外兩種限制酶的原因分別是 質(zhì)粒上不含限制酶Ⅲ的識別序列及其切割位點(diǎn)，選用限制酶1可能會使質(zhì)粒中的啟動子丟失（或四環(huán)素基因是標(biāo)記基因之一，若用限制酶I處理質(zhì)粒，則會使該標(biāo)記基因失去標(biāo)記作用）
質(zhì)粒上不含限制酶Ⅲ的識別序列及其切割位點(diǎn)，選用限制酶1可能會使質(zhì)粒中的啟動子丟失（或四環(huán)素基因是標(biāo)記基因之一，若用限制酶I處理質(zhì)粒，則會使該標(biāo)記基因失去標(biāo)記作用）
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】0；4；a；；都不能；Ⅱ、Ⅳ；質(zhì)粒上不含限制酶Ⅲ的識別序列及其切割位點(diǎn)，選用限制酶1可能會使質(zhì)粒中的啟動子丟失（或四環(huán)素基因是標(biāo)記基因之一，若用限制酶I處理質(zhì)粒，則會使該標(biāo)記基因失去標(biāo)記作用）
；都不能；Ⅱ、Ⅳ；質(zhì)粒上不含限制酶Ⅲ的識別序列及其切割位點(diǎn)，選用限制酶1可能會使質(zhì)粒中的啟動子丟失（或四環(huán)素基因是標(biāo)記基因之一，若用限制酶I處理質(zhì)粒，則會使該標(biāo)記基因失去標(biāo)記作用）【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：2難度：0.7
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